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Progressi delle moderne scienze naturali. Determinazione della vitamina C nei materiali di prova

Il livello di elementi (Zn, Mn, Co, Ni, Mg, Fe, Cu, Cr, Pb. As, Na, Hg) e antiossidanti a basso peso molecolare (tannidi, flavonoidi, acido ascorbico) nei campioni di tè acquistati nella rete commerciale della regione di Orenburg è stata determinata. Il contenuto di elementi standardizzati (Pb, Cd, As, Hg) nei campioni di tè testati non supera gli standard stabiliti in Russia. È stata calcolata la correlazione tra i livelli di alcuni elementi e di antiossidanti nei campioni di tè.

microelementi

metalli pesanti

antiossidanti

flavonoidi

acido ascorbico

Thea sinensis L.

1. GOST 30692-2000. Norma interstatale. Metodo dell'adsorbimento atomico per la determinazione dei metalli pesanti. – Minsk: Consiglio interstatale per la standardizzazione, la metrologia e la certificazione.

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Numerosi lavori sulla scienza della nutrizione hanno notato gravi violazioni nella dieta della popolazione russa, menzionando principalmente la carenza di vitamine, sostanze biologicamente attive, macro e microelementi. Ciò dovrebbe aiutare a ridurre la resistenza complessiva del corpo a fattori ambientali sfavorevoli, l’interruzione della protezione antiossidante, la formazione di stati di immunodeficienza e lo sviluppo di una serie di malattie croniche. Uno dei compiti formulati nel Concetto di politica statale nel campo della sana alimentazione della popolazione russa è l'eliminazione della carenza di micronutrienti nella dieta della popolazione. Uno degli strumenti per ottimizzare la nutrizione della popolazione russa è considerato prodotti alimentari specializzati e biologicamente additivi attivi al cibo.

I prodotti alimentari di origine vegetale e animale devono normalmente contenere sostanze biologicamente attive (BAS): certe aminoacidi essenziali, peptidi esogeni, vitamine, fitoncidi, polifenoli, alcaloidi, glicosidi, acidi organici, oli essenziali e alcuni altri composti. Ruolo fisiologico e sono stati ora studiati i meccanismi d'azione biochimici di molte sostanze biologicamente attive (BAS) e microelementi. Di conseguenza, la necessità della presenza di sostanze biologicamente attive e microelementi nella dieta ha acquisito giustificazione scientifica.

Per i residenti della regione del Volga-Urali è abbastanza difficile da fornire Nutrizione corretta nel periodo invernale-primaverile per molte posizioni. Pertanto, abbiamo prestato attenzione al tè, che contiene un complesso di sostanze e microelementi biologicamente attivi ed è la bevanda più comune in Russia.

Lo scopo del nostro studio era studiare il contenuto di microelementi e antiossidanti a basso peso molecolare nel tè delle varietà e dei marchi più ampiamente distribuiti nella rete commerciale della regione Volga-Ural.

Materiali e metodi di ricerca

Il tè è stato a lungo utilizzato come agente preventivo e terapeutico per numerose malattie. Tannidi, flavonoidi e acidi fenolicarbossilici contenuti nelle foglie di tè mostrano una pronunciata attività antiossidante, neutralizzando efficacemente i radicali liberi nei tessuti umani.

La tassonomia della pianta del tè è ambigua e quindi questa pianta ha diversi nomi: Thea sinensis L., Camellia sinensis L. (O. Ktze), Camellia thea Link. e Camellia theifera Griff.

Oggetto dello studio erano varietà di tè molto apprezzate dalla popolazione locale:

Tè nero in busta “Beseda”;

Tè del drago verde;

Tè verde cinese in busta “Akbar”;

Bustine di tè verde “Akhmad”;

Tè nero lungo confezionato “Princess Nuri”;

Tè nero lungo granulato di prima scelta “Golden Bowl”;

Tè verde a foglia lunga “Akhmad”;

Tè nero a foglia lunga “Princess Nuri” Pekoe;

Tè nero di Ceylon a foglia lunga “Riston”;

Tè nero di Ceylon “Riston” in foglie piccole;

Tè verde a foglia larga sfuso (Taiwan) “Sen-cha”;

Tè nero a foglie grandi “Howery orange Pekoe”, “Ceylon dandy”;

Tè nero indiano a foglia larga “Dilmah”;

Tè Akbar.

Nei campioni di tè è stato determinato il contenuto di elementi chimici, acido ascorbico, tannini e flavonoidi. La ricerca è stata condotta sulla base del complesso laboratorio analitico interdipartimentale dell'Università agraria statale di Orenburg. Il contenuto di antiossidanti polifenolici è stato determinato mediante cromatografia liquida ad alta prestazione. La determinazione della composizione elementare dei campioni di tè è stata effettuata mediante spettrometria di assorbimento atomico. La presenza e il contenuto quantitativo di acido ascorbico nei campioni di tè studiati sono stati determinati mediante metodi accettati in biochimica.

Risultati della ricerca e discussione

È noto che il contenuto minerali nelle foglie di tè è circa il 4-5% nelle foglie di tè e il 5-6% nella bevanda finita. Le sostanze minerali presenti nel tè sono in grado di passare in una soluzione acquosa durante la preparazione dei decotti in media del 50-60%. Per alcuni elementi il grado di estrazione con acqua durante la preparazione dei decotti raggiunge il 90-95%, arricchendo così il decotto necessario per il corpo micro e macroelementi umani.

Le funzioni dei microelementi nel corpo di piante e animali sono diverse. Il ruolo di molti elementi biogenici è stato studiato in modo abbastanza approfondito e per alcuni si presume la loro partecipazione al lavoro degli enzimi. Elevate concentrazioni di metalli pesanti hanno un effetto negativo sul metabolismo cellulare. Se ne conoscono diversi meccanismi molecolari effetti tossici dei metalli pesanti. Molti ricercatori mettono al primo posto la formazione delle specie reattive dell'ossigeno, l'autossidazione e le reazioni di Fenton (1) e Haber-Weiss (2), (3). Questo meccanismo è tipico dei metalli a valenza variabile (Cu, Fe, Mn, Co e altri) e porta alla formazione di radicali ossidrili altamente tossici:

Ìe(n-1)+ + H2О2 → Uomini+ + HO- + HO.. (1)

La riduzione dei metalli è fornita dall'anione superossido:

О2.-+ Ìen+ → Ìe(n-1)+ + О2. (2)

Il ciclo Haber-Weiss è una reazione totale: la riduzione dei perossidi attraverso l'anione superossido con la partecipazione di metalli con un cambiamento di valenza:

O2.-+ H2O2 → O2 + HO- + HO.. (3)

Il radicale idrossile (HO.) è un potente agente ossidante che non è in grado di migrazione intracellulare, poiché reagisce istantaneamente con le molecole biologiche. Il radicale idrossile avvia la perossidazione lipidica, la distruzione della membrana, la degradazione delle proteine, il danno al DNA e all'RNA. Nelle cellule vegetali non esistono sistemi enzimatici in grado di neutralizzare i radicali idrossilici, il che aumenta il ruolo della componente non enzimatica della protezione antiossidante.

Un altro meccanismo dell'effetto tossico dei metalli pesanti è il blocco dei gruppi funzionali nelle biomolecole (principalmente sulfidruro), questa reazione è principalmente caratteristica di metalli pesanti inattivi redox come cadmio e mercurio. È caratteristico che l'effetto sulle piante concentrazioni aumentate I metalli inattivi al redox spesso portano anche ad un aumento della perossidazione lipidica. È stato dimostrato che il cadmio e alcuni altri metalli inibiscono gli enzimi antiossidanti, in particolare la glutatione reduttasi.

In conformità con SanPiN 2.3.2.1078-01 “Requisiti igienici per la sicurezza e il valore nutrizionale dei prodotti alimentari”, sono definiti i limiti massimi nel tè livelli consentiti mercurio, arsenico, piombo e cadmio (Tabella 1).

Tabella 1

Razionamento dei metalli pesanti nel tè

L'analisi del contenuto di elementi chimici nelle foglie di tè indica differenze significative negli indicatori per i diversi tipi di tè (Tabella 2). Questo fatto può essere spiegato dal fatto che la formazione della composizione chimica dei tessuti vegetali in condizioni naturali avviene sotto l’influenza simultanea di un gran numero di fattori ambiente esterno, il che rende difficile studiare i modelli di assorbimento degli elementi chimici.

Tavolo 2

Elementi (mg/kg)

"Conversazione"

Cinese in busta verde

"Dragone verde"

"Akbar" cinese

Ahmad insaccato verde"

Foglia lunga insaccata nera

"Principessa Nuri"

Baikhovy indiano granulato nero

"Coppa d'Oro"

Verde frondoso

baikhovy "Akhmad"

Foglia lunga nera a foglia grande

"Principessa Nuri"

Ceylon "Riston" a foglia lunga nera a foglia larga

Foglia verde sciolta (Taiwan)

Pekoe arancio Howery nero a foglia grande

Il "dandy di Ceylon" celoniano

"Dilmah" indiano a foglia grande nera

Baykhovy "Akbar" nero a foglia larga

Il contenuto di rame nei campioni di tè studiati varia da 0,04 mg/kg a 0,17 mg/kg (Tabella 2, Fig. 1). Non è stata riscontrata alcuna dipendenza del contenuto di rame dalla varietà e dalla marca del tè (Fig. 1). I leader nel contenuto di rame sono il tè nero granulato “Golden Chalice” e il tè nero a foglie grandi “Princess Nuri”. Il tè nero a foglia lunga “Akbar” ha il contenuto di rame più basso tra i campioni studiati.

È noto che il rame fa parte dei centri attivi di numerosi enzimi della sottoclasse delle ossidasi: polifenolossidasi, ascorbato ossidasi e altri enzimi fotosintetici. Nel corpo umano, il rame influenza i processi di emopoiesi e il funzionamento delle ghiandole secrezione interna, influenza le funzioni delle ovaie, favorisce l'assorbimento della vitamina C. Maggiori concentrazioni di rame hanno un effetto citotossico e genotossico, poiché sono un fattore di attivazione radicale. Fabbisogno giornaliero in rame è di circa 1-2 mg per un adulto.

Il contenuto di nichel nei campioni studiati variava da 0,04 a 0,38 mg/kg (Tabella 2, Fig. 1) e inoltre non dipende dal tipo di tè. I leader nel contenuto di nichel sono: tè nero in busta “Beseda”; tè nero a foglia lunga “Princess Nuri” Pekoe; tè verde a foglia larga sfuso (Taiwan) “Sen-cha”. Il tè nero a foglia lunga “Akbar” è caratterizzato dal più basso contenuto di nichel (Tabella 2, Fig. 1).

Riso. 1. Contenuto di microelementi Cu, Ni, Mn nei campioni di tè (mg/kg): 1 - tè nero “Beseda” in busta; 2 - tè verde cinese “Green Dragon” in busta; 3 - tè verde cinese “Akbar” in busta; 4 - tè verde confezionato “Akhmad”; 5 - tè nero in busta “Princess Nuri”; 6 - tè nero lungo granulato di prima scelta “Golden Bowl”; 7 - tè verde a foglia lunga “Akhmad”; 8 - tè nero a foglia lunga “Princess Nuri” Pekoe; 9 - tè nero di Ceylon a foglia larga “Riston”; 10 - Tè nero di Ceylon in foglie piccole “Riston”; 11 - tè verde a foglia larga sfuso (Taiwan) “Sen-cha”; 12 - tè nero a foglia larga “Howery orange Pekoe”, “Ceylon dandy”; 13 - tè indiano nero a foglie grandi “Dilmah”; 14 - tè nero a foglia lunga “Akbar”

Il nichel è un microelemento che ha un effetto non specifico su un numero di metalloenzimi, partecipando così a molte reazioni cellulari. Il nichel attiva l'arginasi, l'ossalacetato decarbossilasi, le transaminasi, accelera l'ossidazione dei gruppi solfidrico in gruppi disolfuro, inibisce la fosfatasi, stabilizza il funzionamento dell'apparato di traduzione e stimola la sintesi degli antociani. Il fabbisogno giornaliero di nichel di una persona, a seconda dell'età, del sesso e del peso, è di circa 100-300 mcg. Concentrazioni elevate di nichel possono favorire un aumento della perossidazione lipidica della membrana.

Il manganese è un elemento biogenico che fa parte di molte metalloflavoproteine che prendono parte ai processi redox (fotosintesi, glicolisi, ciclo degli acidi tricarbossilici). Nelle piante, il manganese attiva gli enzimi per la biosintesi di carboidrati, steroidi, tannidi, alcaloidi, acido ascorbico e vitamina B2, partecipa ai processi di respirazione, fotosintesi, fissazione dell'azoto ed è responsabile dell'ossidazione del ferro. Il fabbisogno umano giornaliero di manganese è di 5-10 mg. Nel corpo umano il manganese è coinvolto nel processo di osteogenesi, nelle reazioni immunitarie, nei processi di emopoiesi e nella respirazione dei tessuti e in generale nelle reazioni metaboliche.

Il contenuto massimo di manganese è caratterizzato dalla varietà di tè “Beseda”, dal tè nero in busta (0,38 mg/kg) e dal tè nero a foglie grandi “Princess Nuri” (0,36 mg/kg). Il contenuto di nichel più basso è stato osservato nelle varietà di tè nero a foglie grandi dei marchi Akbar e Ceylon Goldfinch.

Lo zinco fa parte dei centri attivi di numerosi enzimi (in particolare enzimi per la sintesi dei polifenoli). Lo zinco aumenta la resistenza delle piante alla siccità e all'ipertermia. Il fabbisogno umano giornaliero di zinco è di circa 10-25 mg. Nel corpo umano, lo zinco partecipa alle reazioni metaboliche generali, all'osteogenesi, al metabolismo degli zuccheri e dell'insulina, alla sintesi proteica e acidi nucleici, è necessario per il normale funzionamento del sistema riproduttivo. Per elevate concentrazioni di zinco è stato stabilito un effetto genotossico.

Il contenuto massimo di zinco si osserva nel tè nero a foglie lunghe “Riston” a foglie piccole - 5,73 mg/kg; una quantità leggermente inferiore di zinco è contenuta nel tè nero a foglie lunghe confezionato “Princess Nuri”. Il minimo è nel cardellino nero a foglia larga "Tselona Cardellino" - 1,01 mg/kg (Tabella 1, Fig. 2).

Il magnesio è un attivatore di oltre 300 enzimi coinvolti nei processi metabolici. Il magnesio è un elemento S e non rientra nei cosiddetti “metalli pesanti”. Nel corpo umano, il magnesio influisce sul funzionamento di del sistema cardiovascolare, favorisce la trasmissione degli impulsi nervosi, ha effetto spasmodico e vasodilatatore, stimola la peristalsi, aumenta la secrezione biliare e aiuta a mantenere l'equilibrio acido-base. Il fabbisogno giornaliero di magnesio è in media di circa 400 mg.

Il contenuto massimo di magnesio si osserva nelle bustine di tè nero “Beseda” - 3,41 mg/kg e nelle bustine di tè verde “Green Dragon” (3,01 mg/kg). Il contenuto minimo di magnesio (0,01 mg/kg) è caratteristico delle varietà nere “Cardellino di Ceylon” a foglie grandi, “Dilmah” nere a foglie grandi e “Akbar” nere a foglie grandi (Tabella 1, Fig. 2).

Il ferro fa parte degli enzimi vegetali che prendono parte a molte reazioni redox. È noto il ruolo del ferro nei processi di fotosintesi, respirazione dei tessuti, sintesi della clorofilla e metabolismo dello zolfo e dell'azoto. La carenza di ferro nelle piante porta alla clorosi delle foglie e persino alla morte dei giovani germogli. Nel corpo umano, il ferro è contenuto nella struttura di molte proteine complesse: emoglobina, mioglobina, citocromi, perossidasi. Il fabbisogno giornaliero di ferro del corpo umano adulto varia da 10 a 30 milligrammi. La carenza di ferro è una delle forme più comuni di ipomicroelementosi umana.

Il contenuto massimo di ferro è stato osservato nel tè nero di Ceylon "Riston" a foglie grandi - 7,42 mg/kg, nel tè "Princess Nuri" in busta nera - 7,02 mg/kg e nel tè verde "Ahmad" - 6,42 mg/kg (Fig. 2). Il contenuto di ferro più basso è caratterizzato dal tè cinese verde in busta “Green Dragon” - 0,61 mg/kg (Tabella 1, Fig. 2).

Il cobalto partecipa alle reazioni di fosforilazione, fa parte della vitamina B12 e di alcuni altri composti che legano l'ossigeno, attiva gli enzimi simbiotici di fissazione dell'azoto ed è quindi associato alla biosintesi di aminoacidi e alcaloidi. Ci sono suggerimenti che questo elemento stimola il processo di fecondazione. Nel corpo umano e animale, gli ioni cobalto partecipano all'emopoiesi e al metabolismo del ferro, dei carboidrati e dei lipidi. Esistono informazioni sull'effetto del cobalto sulla funzione della ghiandola tiroidea e sulle condizioni del miocardio. Il fabbisogno giornaliero di cobalto di un adulto è in media di circa 0,1-0,2 mg.

La concentrazione di cobalto nei campioni di tè studiati variava da 0,01 mg/kg a 0,09 mg/kg (Tabella 1, Fig. 3). Il contenuto massimo è stato osservato nelle varietà di tè verde: “Green Dragon” cinese in busta verde e “Ahmad” a foglia verde. Le seguenti varietà di tè nero sono caratterizzate da un contenuto minimo di cobalto: il Ceylon “Riston” a foglia larga e l'indiano granulato “Golden Cup”.

Il ruolo fisiologico del cromo nelle piante non è stato sufficientemente studiato; si presume la sua partecipazione alla fotosintesi e alla produzione di flavonoidi. Nel corpo umano, il cromo partecipa alla regolazione del metabolismo dei carboidrati ed è un componente di un complesso organico a basso peso molecolare: il fattore di tolleranza al glucosio. La carenza di cromo può causare una condizione simile al diabete. L'apporto giornaliero di cromo nella dieta di un adulto è in media di 0,2-0,25 mg. La carenza di cromo porta a un ritardo della crescita, a disturbi dell'attività nervosa superiore e a una diminuzione della capacità fecondante degli spermatozoi.

Il contenuto massimo di cromo si osserva nelle varietà di tè: “Green Dragon” in busta verde (0,17 mg/kg), “Beseda” in busta nera (0,15 mg/kg) e “Akhmad” in foglia verde (0,15 mg/kg). Il contenuto minimo di cromo è stato registrato nel tè nero di Ceylon a foglia larga “Riston” (0,01 mg/kg), tè nero indiano a foglia larga “Dilmah”, tè verde tè sfuso in foglie“Sen-cha” e tè verde in busta “Akhmad” (0,02 mg/kg).

Tra i microelementi da noi studiati, l’elemento S sodio non è classificato come “metallo pesante”. Negli organismi viventi, gli ioni sodio aiutano a mantenere l'equilibrio idroelettrolitico. Il contenuto di sodio nelle piante è in media dello 0,02%. Gli ioni sodio prendono parte al trasporto di sostanze attraverso le membrane, utilizzando l'ATPasi Na+/K+. Il contenuto massimo di sodio è stato osservato nel tè verde cinese in buste della marca “Green Dragon”: 1,61 mg/kg (Tabella 1, Fig. 4). Il tè nero indiano granulato “Golden Bowl” ha il contenuto minimo di sodio (0,12 mg/kg).

Piombo e cadmio sono considerati i principali fitotossici tra i metalli pesanti da noi analizzati in quanto non sono biogenici, ma sono caratterizzati da elevata tossicità e tasso di accumulo in ambiente. Il piombo è meno tossico per le piante che per gli esseri umani e gli animali, poiché i suoi composti sono scarsamente solubili, il che ne riduce la biodisponibilità. L'effetto tossico del piombo è associato al fatto che gli ioni piombo formano mercaptidi stabili con i gruppi solfidrico degli enzimi contenenti SH e quindi portano al blocco dei sistemi enzimatici. Nel corpo umano, il piombo interrompe la sintesi dell'emoglobina, degli acidi nucleici, delle proteine e degli ormoni. Il piombo colpisce il sistema ematopoietico, nervoso e renale. Quando il piombo si accumula nel corpo, si sviluppa l'anemia, debolezza generale, si verifica la tubercolosi, la degenerazione dei tessuti, del fegato e dei reni.

Contenuto più alto piombo è stato notato nelle varietà di tè "Beseda" nero a foglia lunga confezionato, "Princess Nuri" nero a foglia lunga a foglia larga e nella varietà "Sen-cha" verde a foglia larga - 0,13 mg/kg (Tabella 1, Figura 5). Il contenuto di piombo più basso è tipico delle seguenti varietà: “Cardellino di Ceylon” a foglia larga nera, “Dilmah” a foglia larga nera, “Akbar” a foglia larga nera (0,01 mg/kg).

Il cadmio è un pericoloso fitotossico per la vita vegetale e interrompe attivamente il funzionamento dei sistemi enzimatici. Il cadmio viene assorbito più facilmente dal sistema radicale e dalle foglie rispetto al piombo. Il cadmio è in grado di inibire gli enzimi antiossidanti, in particolare la glutatione reduttasi, causando danni alle membrane cellulari e al DNA. Nell'igiene alimentare umana, il cadmio è considerato uno dei tossici ambientali più pericolosi. L'emivita del cadmio è superiore a 10 anni, quindi è possibile l'avvelenamento cronico con questo elemento. I sintomi di avvelenamento comprendono danni ai reni e al sistema nervoso, seguiti da dolore osseo acuto e talvolta da compromissione della funzionalità polmonare.

Le varietà con il più alto contenuto di cadmio sono: tè nero in busta “Princess Nuri” (0,13 mg/kg), tè verde a foglia lunga “Akhmad” (0,08 mg/kg), tè verde cinese in busta “Green Dragon” (0,08 mg /kg), tè verde confezionato “Akhmad” (0,08 mg/kg). Il contenuto minimo di cadmio (0,01 mg/kg) è stato stabilito in campioni di tè in bustine di tè verde a foglia lunga "Akbar", tè di Ceylon nero a foglia larga "Riston", tè nero a foglia larga "Ceylon Cardellino" (Tabella 1, Fig. .5).

A causa della capacità della maggior parte dei microelementi studiati di prendere parte ai processi ossidativi delle cellule viventi, abbiamo tentato di determinare il livello dei componenti della componente non enzimatica della protezione antiossidante delle foglie di tè (Tabella 3). Il tè, come tutte le piante superiori, è caratterizzato da una tolleranza piuttosto elevata agli effetti dell'aumento delle concentrazioni di metalli pesanti. I meccanismi di resistenza delle piante includono la ritenzione di metalli pesanti negli organi sotterranei per proteggere gli organi assimilativi e generativi. Oltre alla produzione di antiossidanti a basso peso molecolare (polifenoli, acido ascorbico, carotenoidi, tocoferolo).

I derivati dei fenoli svolgono un ruolo importante nell'aumentare la resistenza allo stress delle piante e numerosi studi rilevano l'induzione della sintesi di composti polifenolici sotto l'influenza di fattori tecnogenici. Le sostanze del gruppo dei polifenoli hanno la capacità di inibire la perossidazione lipidica delle membrane cellulari, che può essere grossolanamente rappresentata dal seguente diagramma schematico:

1) Istruzione R.

2) R. + O2 → RO2.

3)RO2. + DE → ROOH + DE.

I composti fenolici sono in grado di bloccare l’interazione del substrato ossidante con il radicale perossido e, quindi, inibire l’ossidazione a catena secondo il seguente schema:

PhOH+RO2. → PhO. +ROOH.

Di conseguenza, l'ossidazione dello ione fenolato produce un radicale fenossilico, che subisce dimerizzazione per formare legami carbonio-carbonio o carbonio-ossigeno:

2 F.O. + 2HS-G → 2PhOH + GS-SG.

Pertanto, i composti fenolici nei tessuti vegetali svolgono funzioni antiossidanti.

L'acido ascorbico è anche tra i composti che aiutano ad aumentare la resistenza cellulare alle condizioni avverse, anche grazie alla sua capacità di esibire proprietà antiossidanti:

HO-chiedi-OH + R-C. → HO-chiedi-O. + R-CH;

2 HO-chiedi-O.+ 2 HS-G → 2 HO-chiedi-OH + GS-SG.

Il contenuto di flavonoidi nei campioni di tè studiati varia da 2,25±0,05 mg/kg a 4,01±0,07 mg/kg (Tabella 3). Non esiste una chiara dipendenza del contenuto di flavonoidi dal tipo di tè (Tabella 3, Fig. 6). In generale, le varietà di tè granulato e di tè in bustine sono caratterizzate da un contenuto di flavonoidi leggermente ridotto (da 2,25 ± 0,07 a 3,80 ± 0,04 mg/kg). Il contenuto di flavonoidi nelle varietà a foglia larga è leggermente più alto: da 3,10±0,04 a 4,01±0,07 mg/kg.

Tabella 3

Varietà di tè
Varietà di tè	vitamina C	flavonoidi
In busta nera baikhovy "Conversazione"
Cinese in busta verde "Dragone verde"
Foglia lunga insaccata verde "Akbar" cinese
Ahmad insaccato verde"
Foglia lunga insaccata nera "Principessa Nuri"
Granulare nero “Ciotola d’oro” indiana Baikhovy
Foglia lunga verde “Akhmad”
Foglia lunga nera a foglia grande "Principessa Nuri"
Foglia grande nera Baikhovy Ceylon "Riston"
Foglia nera foglia piccola foglia lunga “Riston”
Foglia verde grande sciolto (Taiwan) "Sen-cha"
Celoniano nero a foglie grandi "Dandy di Ceylon"
"Dilmah" indiano a foglia grande nera
Foglia lunga nera a foglia larga "Akbar"

Un gruppo di enzimi flavoproteici attivati dagli ioni rame, manganese, zinco e molibdeno partecipa alla biogenesi dei composti polifenolici e dell'ascorbato. In condizioni di aumento del contenuto di metalli pesanti, si può supporre l'induzione della sintesi di antiossidanti a basso peso molecolare, che è associata all'effetto citoprotettivo e stabilizzante della membrana di questi composti in condizioni di stress ossidativo. D’altro canto, un buon apporto di piante con microelementi, che sono componenti dei centri attivi delle ossidoreduttasi (Cu, Co, Zn, Ni, Fe), può contribuire all’induzione della sintesi di antiossidanti (flavonoidi, tanidi, antociani , acidi fenolcarbossilici e acido ascorbico). Abbiamo calcolato la correlazione tra il contenuto di tredici elementi essenziali e tossici e il contenuto di tannini, flavonoidi e acido ascorbico (Tabelle 3, 4).

Tabella 4

Correlazione del contenuto di antiossidanti idrosolubili e microelementi nelle foglie di tè (mg/kg)

Nei campioni di tè studiati, esiste una correlazione positiva pronunciata tra il contenuto di vitamina C e i microelementi nelle piante di tè: Cr (0,81), Co (0,82), Mg (0,54), Na (0,64). Per i restanti microelementi, i livelli di correlazione positiva variavano da 0,23 (zinco/ascorbato) a 0,47 (ferro/tannidi), i livelli di correlazione negativa variavano da -0,22 (sodio/tannidi) a -0,45 (ferro/flavonoidi; zinco/tannidi). Non esiste alcuna correlazione tra il contenuto di rame dei campioni di tè e gli antiossidanti a basso peso molecolare. Non è stata riscontrata alcuna correlazione tra il contenuto di nichel e cromo nel tè con il contenuto di flavonoidi e tra il contenuto di manganese e cadmio con la vitamina C. Per gli elementi tossici piombo e cadmio è stata riscontrata una correlazione positiva tra il loro contenuto e il contenuto di acido ascorbico e una correlazione negativa con il contenuto di flavonoidi e tannini. Una marcata correlazione negativa (-0,61) è caratteristica solo tra il contenuto di cadmio e i flavonoidi. Per gli altri elementi la correlazione è debole (da 0,1 a 0,46).

1. Uno studio su 14 campioni di tè acquistati nella città di Orenburg ha permesso di determinare le caratteristiche della loro composizione elementare. I dati presentati indicano che i livelli di elementi essenziali e tossici nei campioni di tè commerciale talvolta differiscono di un ordine di grandezza e non dipendono dalla varietà e dalla marca di tè. In tutti i campioni di tè testati, il contenuto di cadmio e piombo non supera gli standard stabiliti (SanPiN 2.3.2.1078-01). Nei campioni studiati non sono stati rilevati mercurio e arsenico.

2. Non c'era alcuna correlazione tra il contenuto di tannini, flavonoidi e vitamina C sul tipo di tè, ma in alcuni casi c'era una correlazione tra il contenuto di metalli pesanti e i suddetti antiossidanti nel tè. Il contenuto di vitamina C nei campioni di tè è correlato alle concentrazioni di cromo, cobalto e magnesio. Il livello di flavonoidi nel tè mostra una correlazione positiva con il livello di cobalto e una correlazione negativa con il contenuto di cadmio. Il contenuto di tannidi ha una debole correlazione negativa con tutti gli elementi studiati, ad eccezione del ferro, con il quale si osserva una correlazione positiva. La concentrazione di rame nei campioni di tè non è correlata al contenuto di antiossidanti a basso peso molecolare.

3. Considerando l'elevata importanza del tè come fonte di sostanze biologicamente attive per la popolazione russa, è necessario effettuare ricerche dettagliate per identificare le varietà di tè con il massimo contenuto di antiossidanti.

Collegamento bibliografico

Nemereshina O.N., Gusev N.F., Filippova A.V. CONTENUTO DI ANTIOSSIDANTI IDROSOLUBILI E MICROELEMENTI NEI CAMPIONI DI TÈ // Progressi nelle moderne scienze naturali. – 2013. – N. 11. – P. 54-64;
URL: http://natural-sciences.ru/ru/article/view?id=33120 (data di accesso: 30/04/2019). Portiamo alla vostra attenzione le riviste pubblicate dalla casa editrice "Accademia delle Scienze Naturali"

GOST R54037-2010

Gruppo H09

STANDARD NAZIONALE DELLA FEDERAZIONE RUSSA

PRODOTTI ALIMENTARI

Determinazione del contenuto di antiossidanti idrosolubili mediante metodo amperometrico in verdure, frutta, prodotti trasformati, bevande alcoliche e analcoliche

Prodotti alimentari. Determinazione del contenuto di antiossidanti idrosolubili mediante metodo amperometrico in verdure, frutta, prodotti della loro lavorazione, bevande alcoliche e analcoliche

OK 67.080
67.160.10

67.160.20
OKSTU9109

Data di introduzione 2012-01-01

Prefazione

Gli obiettivi e i principi della standardizzazione nella Federazione Russa sono stabiliti dalla legge federale del 27 dicembre 2002 N 184-FZ "Sulla regolamentazione tecnica" e le regole per l'applicazione degli standard nazionali della Federazione Russa sono GOST R 1.0-2004 "Standardizzazione in Federazione Russa. Disposizioni fondamentali"

Informazioni standard

1 SVILUPPATO dall'impresa unitaria dello Stato federale "Istituto panrusso di ricerca scientifica di misurazioni fisiche, tecniche e di radioingegneria" dell'Agenzia federale per la regolamentazione tecnica e la metrologia (FSUE "VNIIFTRI")

2 INTRODOTTO dal Comitato Tecnico per la Normazione TC 335 “Metodi per testare la sicurezza dei prodotti agroindustriali”

3 APPROVATO con ordinanza dell'Agenzia federale per la regolamentazione tecnica e la metrologia del 30 novembre 2010 N 651-st

4 INTRODOTTO PER LA PRIMA VOLTA

Le informazioni sulle modifiche a questo standard sono pubblicate nell'indice delle informazioni pubblicato annualmente "Norme nazionali" e il testo delle modifiche e degli emendamenti è pubblicato nell'indice delle informazioni pubblicate mensilmente "Norme nazionali". In caso di revisione (sostituzione) o cancellazione della presente norma, il corrispondente avviso sarà pubblicato nell'indice informativo pubblicato mensilmente "Norme nazionali". Le informazioni, gli avvisi ed i testi rilevanti sono inoltre pubblicati nel sistema informativo uso comune- sul sito web ufficiale dell'Agenzia federale per la regolamentazione tecnica e la metrologia su Internet

1 zona di utilizzo

Questo standard si applica a verdure, frutta, loro prodotti trasformati, bevande alcoliche e analcoliche e stabilisce un metodo amperometrico per determinare il contenuto di antiossidanti idrosolubili (totale attività antiossidante) nell'intervallo da 0,2 a 4,0 mg/dm compreso.

2 Riferimenti normativi

Questo standard utilizza riferimenti normativi ai seguenti standard:

GOST R ISO 5725-6-2002 Accuratezza (correttezza e precisione) dei metodi e dei risultati di misurazione. Parte 6: Utilizzo dei valori di precisione nella pratica

GOST R 51144-2009 Prodotti vitivinicoli. Regole di accettazione e metodi di campionamento

GOST R 51652-2000 Alcool etilico rettificato da materie prime alimentari. Specifiche

GOST R 53228-2008 Bilance non automatiche. Parte 1. Metrologica e requisiti tecnici. Test

GOST 12.1.004-91 Sistema di standard di sicurezza sul lavoro. Sicurezza antincendio. Requisiti generali

GOST 12.1.019-79 * Sistema di standard di sicurezza sul lavoro. Sicurezza elettrica. Requisiti generali e nomenclatura dei tipi di protezione
______________
*Il documento non è valido sul territorio della Federazione Russa. È valido GOST R 12.1.019-2009, di seguito nel testo. - Nota del produttore del database.

GOST 12.4.021-75 Sistema di standard di sicurezza sul lavoro. Sistemi di ventilazione. Requisiti generali

GOST 1770-74 (ISO 1042-83, ISO 4788-80) Vetreria da laboratorio. Cilindri, bicchieri, beute, provette. Condizioni tecniche generali

Reagenti GOST 4328-77. Idrossido di sodio. Specifiche

Reagenti GOST 4517-87. Metodi per preparare reagenti ausiliari e soluzioni utilizzati nelle analisi

Reagenti GOST 6552-80. Acido fosforico. Specifiche

GOST 6687.0-86 Prodotti dell'industria analcolica. Regole di accettazione e metodi di campionamento

GOST 6709-72 Acqua distillata. Specifiche

GOST 12026-76 Carta da filtro da laboratorio. Specifiche

GOST 12786-80 Birra. Regole di accettazione e metodi di campionamento

GOST 22967-90 Siringhe per iniezione medica per uso multiplo. Requisiti tecnici generali e metodi di prova

GOST 25336-82 Vetreria e attrezzature da laboratorio. Tipi, parametri principali e dimensioni

GOST 26313-84 Prodotti della lavorazione di frutta e verdura. Regole di accettazione, metodi di campionamento

Nota - Quando si utilizza questo standard, è consigliabile verificare la validità degli standard di riferimento nel sistema di informazione pubblica - sul sito web ufficiale dell'Agenzia federale per la regolamentazione tecnica e la metrologia su Internet o secondo l'indice informativo pubblicato annualmente "Nazionale Standards", pubblicata a partire dal 1° gennaio del corrente anno, e secondo i corrispondenti indici informativi mensili pubblicati in quest'anno. Se lo standard di riferimento viene sostituito (modificato), quando si utilizza questo standard dovresti essere guidato dallo standard sostitutivo (modificato). Se la norma di riferimento viene annullata senza sostituzione, la disposizione in cui ad essa è fatto rinvio si applica nella parte che non pregiudica tale rinvio.

3 Termini e definizioni

In questo standard viene utilizzato il seguente termine con la definizione corrispondente:

3.1 antiossidanti: Sostanze che interrompono i processi di ossidazione a catena radicalica in oggetti di origine organica e inorganica.

4 Essenza del metodo

Il metodo amperometrico consiste nel misurare l'intensità della corrente elettrica che si verifica durante l'ossidazione della sostanza in esame (o miscela di sostanze) sulla superficie dell'elettrodo di lavoro ad un certo potenziale e nel confrontare il segnale risultante con il segnale dello standard ( quercetina) nelle stesse condizioni di misurazione.

5 Strumenti di misura, attrezzature, reagenti, materiali

5.1 Analizzatore di flusso amperometrico (di seguito denominato dispositivo) con software speciale per la raccolta e l'elaborazione dei dati, ad esempio “Tsvet Yauza-01-AA”.

5.2 Bilance da laboratorio di una classe di precisione speciale secondo GOST R 53228 con limiti di errore assoluto consentito di ±0,2 mg.

5.3 Omogeneizzatore - Mulino tipo Cyclotec o equivalente.

5.4 Centrifuga da banco da laboratorio con velocità di rotazione fino a 3000 giri/min.

5.5 Matracci tarati 1-10, 1-50, 1-250, 1-1000 secondo GOST 1770.

5.6 Dispensatori di pipette monocanale di volume variabile 5-50 mm e 100-1000 mm con un errore di misurazione non superiore al 5%.

5.7 Siringa medica con una capacità di 1 cm o monouso secondo GOST 22967.

5.8 Tazze di pesatura tipo SV 24/10 con una capacità di 24 cm secondo GOST 25336.

5.9 Carta da filtro da laboratorio secondo GOST 12026.

5.10 Imbuto chimico in vetro secondo GOST 25336.

5.11 Acqua distillata secondo GOST 6709.

5.12 Acqua bidistillata.

5.13 Acido fosforico secondo GOST 6552, grado analitico. o grado di reagente

5.14 Alcool etilico rettificato da materie prime alimentari secondo GOST R 51652.

5.15 Quercetina. ch.d.a.

5.16 Idrossido di sodio, grado analitico. secondo GOST 4328.

5.17 Miscela di cromo per lavare i piatti, preparata secondo GOST 4517.

È consentito utilizzare altri strumenti di misurazione con caratteristiche metrologiche e apparecchiature con caratteristiche tecniche, nonché altri reagenti e materiali di qualità non inferiore a quelli specificati nella presente norma.

6 Preparazione per effettuare le misurazioni

6.1 Campionamento

Il campionamento dei prodotti alimentari viene effettuato in conformità con i requisiti degli standard per alcuni tipi di prodotti alimentari e materie prime alimentari, ad esempio campioni di birra secondo GOST 12786, campioni di prodotti dell'industria analcolica secondo GOST 6687.0, campioni di frutta e prodotti per la lavorazione di verdure secondo GOST 26313, campioni di prodotti dell'industria vinicola secondo GOST R 51144.

6.2 Preparazione della vetreria da laboratorio

La vetreria nuova e contaminata viene lavata accuratamente con una soluzione di miscela di cromo, dopo di che viene risciacquata più volte, prima con acqua di rubinetto e poi più volte con acqua distillata. Infine, le stoviglie vengono risciacquate tre volte con acqua bidistillata.

6.3 Preparazione delle soluzioni

6.3.1 Preparazione dell'eluente (soluzione di acido ortofosforico molare concentrazione 2,2 mmol/dm)

Circa 700 mL di acqua bidistillata vengono versati in un matraccio tarato da 1000 mL e vengono aggiunti 0,15 mL di acido ortofosforico concentrato e 10,0 mL di acqua al 96% utilizzando un erogatore a pipetta. alcol etilico, la soluzione risultante viene portata a bollitura con acqua bidistillata. Mescolare accuratamente.

La durata di conservazione sotto cappa aspirante in un pallone con tappo smerigliato è di 1 mese.

6.3.2 Preparazione di idrossido di sodio con una concentrazione di 0,1 mol/dm

Un campione di 1,0 g di idrossido di sodio viene sciolto in acqua distillata priva di anidride carbonica e trasferito quantitativamente in un matraccio tarato da 250 cm 3. Il volume della soluzione viene portato alla tacca con acqua distillata e mescolato accuratamente.

6.3.3 Preparazione delle soluzioni di quercetina

6.3.3.1 Preparazione di una soluzione madre di quercetina con una concentrazione di 100 mg/dm

Pesare (20,0±0,1) mg di quercetina in una bilancia, aggiungere 6,0 cm di soluzione di idrossido di sodio con una concentrazione molare di 0,1 mol/dm3 secondo 6.3.2. Mescolare fino a completa dissoluzione. Dopo aver sciolto la quercetina, il contenuto del vetro viene trasferito quantitativamente in un matraccio tarato da 200 cm3 e il volume della soluzione viene portato a volume con acqua distillata.

La durata di conservazione della soluzione in frigorifero è di 1 mese.

6.3.3.2 Preparazione delle soluzioni di calibrazione di quercetina con una concentrazione di 0,2; 0,5; 1,0 e 4,0 mg/dm

Nei matracci tarati con una capacità di 10 cm si introducono rispettivamente 0,02, 0,05, 0,1 e 0,4 cm della soluzione di quercetina secondo 6.3.3.1 utilizzando una pipetta dispensatrice e si porta alla tacca con l'eluente.

Le soluzioni di calibrazione della quercetina vengono preparate ogni volta che vengono costruite le caratteristiche di calibrazione.

6.4 Preparazione del campione

6.4.1 Dai campioni liquidi prelevati secondo 6.1, preparare due campioni paralleli di 10 cm di prodotto.

6.4.2 Dai campioni preparati secondo 6.4.1, prelevare 1 cm e diluire con eluente fino a 10 cm.

6.4.3 Il campione preparato secondo 6.4.2 viene filtrato attraverso un filtro di carta.

6.4.4 Campione solido, selezionato secondo 6.1, viene frantumato e omogeneizzato.

Aggiungere un campione di 1,0 g di omogeneizzato in un becher della capacità di 150 cm3, portare l'eluente a 100 cm3 e mescolare accuratamente.

6.4.5 La soluzione viene trasferita in provette coniche da centrifuga e centrifugata a 3000 giri al minuto per 15 minuti. Il liquido surnatante viene drenato, diviso in due campioni paralleli e utilizzato per l'analisi.

Se la concentrazione in massa di antiossidanti nel campione supera l'intervallo di misurazione (4 mg/dm), il campione viene diluito più volte con l'eluente.

6.5 Preparazione dell'apparecchio per il funzionamento

L'installazione, l'accensione e la preparazione dell'analizzatore e del dispositivo di registrazione vengono eseguite in conformità con le istruzioni per l'uso.

Impostare il potenziale operativo su più 1,3 V.

La portata dell'eluente è impostata in conformità con le raccomandazioni del produttore dello strumento.

6.6 Calibrazione dello strumento

6.6.1 Le soluzioni di calibrazione di quercetina (vedere 6.3.3.2) vengono introdotte nel dispositivo in sequenza, iniziando con la soluzione di calibrazione con concentrazione minima. Per fare ciò si lava almeno tre volte una siringa della capacità di 1 cm, riempiendola completamente con acqua bidistillata, e poi una volta con l'apposita soluzione di taratura. Riempire la siringa con la soluzione di calibrazione e lavare l'anello di dosaggio con questa soluzione almeno tre volte.

6.6.2 Al termine dell'operazione secondo 6.6.1, dosare la soluzione di calibrazione nel flusso eluente e, utilizzando il software, registrare il segnale di uscita dell'analizzatore (l'area della curva di uscita).

6.6.3 Ciascuna soluzione di calibrazione viene introdotta cinque volte e, utilizzando il software dell'analizzatore, si calcola il valore medio aritmetico del segnale di uscita dell'analizzatore e la relativa deviazione standard. Se la deviazione standard relativa non supera il 5%, il valore medio aritmetico viene considerato come il valore del segnale di uscita dell'analizzatore corrispondente a una determinata soluzione di calibrazione. Se viene rilevata una deviazione nei risultati della misurazione delle concentrazioni di quercetina superiore al 5%, vengono preparate nuove soluzioni di calibrazione di quercetina e il dispositivo viene nuovamente calibrato secondo 6.6.

6.6.4 Stabilire la caratteristica di calibrazione dell'analizzatore sotto forma di una dipendenza lineare dei valori medi aritmetici del segnale di uscita (vedere 6.6.3) dalla concentrazione di massa di quercetina. La caratteristica di calibrazione è considerata accettabile se la correlazione non è inferiore a 0,99.

6.6.5 La stabilità della caratteristica di calibrazione viene verificata prima di iniziare il lavoro il giorno delle misurazioni. A questo scopo si dosa nell'analizzatore almeno cinque volte una delle soluzioni di calibrazione della quercetina appena preparate (vedi 6.3.3.2), si misura il segnale in uscita e si calcola il suo valore medio aritmetico per gli ingressi successivi (vedi 6.6.1-6.6 .3). Utilizzando la caratteristica di calibrazione precedentemente stabilita (vedi 6.6.4), viene calcolato il valore della concentrazione in massa di quercetina. La caratteristica di calibrazione è considerata stabile se il valore trovato differisce dal valore specificato di non più del ±5%.

Se la condizione di stabilità della caratteristica di calibrazione non è soddisfatta per una sola soluzione di controllo, questa soluzione di controllo viene preparata nuovamente e vengono eseguite misurazioni ripetute. I risultati del controllo ripetuto sono considerati definitivi.

Se la condizione per la stabilità della caratteristica di calibrazione non è soddisfatta per due o più soluzioni di controllo, l'apparecchio viene nuovamente calibrato secondo 6.6.

7 Effettuare le misurazioni

Le misurazioni del contenuto totale di antiossidanti idrosolubili vengono effettuate secondo le istruzioni per questo tipo di dispositivo.

7.1 Effettuare cinque misurazioni consecutive del segnale di uscita dell'analizzatore per ciascun campione parallelo del campione analizzato preparato secondo 6.4 (durante la misurazione, viene utilizzata ogni volta una nuova porzione della soluzione) e, utilizzando la caratteristica di calibrazione secondo 6.6, calcolare il valore del contenuto totale di antiossidanti idrosolubili (in termini di quercetina) per ciascun input. Si calcola la media aritmetica dei valori ottenuti e la relativa deviazione standard. Il valore medio aritmetico viene preso come risultato della misurazione del contenuto totale di antiossidanti idrosolubili (in termini di quercetina) in un campione parallelo preparato se la deviazione standard relativa non supera il 5%.

7.2 Se il valore del segnale di uscita dell'analizzatore è esterno all'intervallo delle caratteristiche di calibrazione, il campione preparato viene diluito con l'eluente e il contenuto totale di antiossidanti idrosolubili (in termini di quercetina) nel campione preparato diluito viene misurato secondo 7.1.

7.3 Le procedure secondo 7.1 e 7.2 vengono eseguite per ciascuno dei due campioni paralleli del campione analizzato. La discrepanza tra i risultati delle misurazioni del contenuto totale di antiossidanti idrosolubili (in termini di quercetina) in campioni paralleli preparati non deve superare i valori limite di ripetibilità specificati in 8.3. In questo caso, la media aritmetica dei valori ottenuti viene presa come risultato della misurazione della concentrazione di massa di antiossidanti (in termini di quercetina) nel campione preparato del campione analizzato.

8 Elaborazione e monitoraggio dell'accuratezza dei risultati di misurazione

8.1 Il contenuto totale di antiossidanti idrosolubili nel campione analizzato, mg/dm, si calcola utilizzando la formula

- fattore di diluizione del campione analizzato.

Il contenuto totale di antiossidanti in un campione solido, mg/dm, viene calcolato utilizzando la formula

dove è il contenuto totale di antiossidanti (in termini di quercetina), determinato utilizzando la caratteristica di calibrazione secondo 6.6.3, mg/dm;

- volume della soluzione (estratto) del campione analizzato, dm;

- fattore di diluizione del campione analizzato;

- porzione pesata della sostanza analizzata, mg.

8.2 Registrazione dei risultati di misurazione

Il risultato finale delle misurazioni del contenuto totale dell'antiossidante determinato nel campione, arrotondato alla terza cifra decimale, viene preso come valore medio aritmetico (, mg/dm, o , mg/g) dai risultati di due definizioni parallele, la discrepanza tra i quali non supera il limite di ripetibilità (vedere 8.3). I risultati delle misurazioni del contenuto totale degli antiossidanti analizzati nel prodotto sono presentati nel modulo

dove è il limite di errore di misurazione assoluto, mg/g.

Il valore viene calcolato utilizzando la formula

dove sono i limiti dell'errore di misurazione relativo del contenuto totale dell'antiossidante analizzato (vedere Tabella 1).

8.3 Monitoraggio dell'accuratezza dei risultati della misurazione

Il controllo dell'accuratezza dei risultati della misurazione è riportato nella Tabella 1.

Tabella 1 - Caratteristiche metrologiche


Componente analizzato	Intervallo di misurazione del contenuto totale, mg/dm	Limiti dell'errore di misurazione relativo ±, %	Standard di controllo operativo, % (0,95)
			Limite di riproducibilità	Limite di ripetibilità
Antiossidante	Da 0,2 a 4,0 incl.

8.4 Controllo degli indicatori di qualità della misurazione

Il controllo degli indicatori di qualità della misurazione in laboratorio comporta il monitoraggio della stabilità dei risultati della misurazione tenendo conto dei requisiti di GOST R ISO 5725-6 (sezione 6) o.

9 Requisiti di sicurezza

Quando si eseguono misurazioni, è necessario rispettare i requisiti di sicurezza quando si lavora con reagenti chimici. Sicurezza elettrica quando si lavora con installazioni elettriche - secondo GOST 12.1.019.

I locali del laboratorio devono essere conformi ai requisiti di sicurezza antincendio secondo GOST 12.1.004 e disporre di attrezzature estinguenti.

La stanza deve essere dotata di ventilazione di mandata e di scarico in conformità con GOST 12.4.021.

Bibliografia


		Raccomandazioni per la standardizzazione interstatale "Sistema statale per garantire l'uniformità delle misurazioni. Controllo di qualità interno dei risultati quantitativi analisi chimica". Adottato dal Consiglio interstatale per la standardizzazione, la metrologia e la certificazione (Protocollo n. 26 del 08/12/2004)

Testo del documento elettronico
preparato da Kodeks JSC e verificato rispetto a:
pubblicazione ufficiale
M.: Standardinform, 2011

MINISTERO DELL'ISTRUZIONE E DELLA SCIENZA DELLA FEDERAZIONE RUSSA

Bilancio dello Stato federale Istituto d'Istruzione

più alto formazione professionale

"UNIVERSITÀ STATALE DI KUBAN"

(FSBEI HPE "KubSU")

Dipartimento di Chimica Analitica

LAVORO DI QUALIFICAZIONE DEL LAUREATO

Valutazione dell'accuratezza della determinazione del contenuto totale di antiossidanti nei prodotti alimentari utilizzando il metodo Frap con rilevamento potenziometrico

Krasnodar 2014

introduzione

Revisione analitica

2 Sinergismo di antiossidanti

3 Classificazione degli antiossidanti

6 Valutazione degli indicatori di precisione (ripetibilità e riproducibilità) e accuratezza della tecnica di analisi

parte sperimentale

2.1 Reagenti iniziali, materiali e attrezzature utilizzate

2 Preparazione delle soluzioni di lavoro

2.1 Preparazione della soluzione di lavoro K3 con una concentrazione di 1 mol/dm3

2.2 Preparazione della soluzione di lavoro K4 con una concentrazione di 0,01 mol/dm3

2.3 Preparazione della soluzione tampone fosfato K-Na con una concentrazione di 0,015 mol/dm3 (pH=7,4)

2.4 Preparazione di una soluzione di lavoro di acido ascorbico con una concentrazione di 0,1 mol/dm3

2.5 Preparazione di una soluzione di lavoro di acido ascorbico con una concentrazione di 0,01 mol/dm3

2.6 Preparazione di una soluzione di lavoro di acido gallico con una concentrazione di 0,1 mol/dm3

2.7 Preparazione di una soluzione di lavoro di acido gallico con una concentrazione di 0,001 mol/dm3

2.8 Preparazione di una soluzione di lavoro di catecolo con una concentrazione di 0,1 mol/dm3

2.9 Preparazione di una soluzione di lavoro di catecolo con una concentrazione di 0,01 mol/dm3

2.10 Preparazione di una soluzione di lavoro di quercetina con una concentrazione di 0,1 mol/dm3

2.11 Preparazione di una soluzione di lavoro di quercetina con una concentrazione di 0,01 mol/dm3

3. Risultati e discussioni

Conclusione

Applicazione

tè campione di cibo antiossidante

introduzione

Nel mondo moderno, malattie come cancro, diabete, artrite, cataratta, ecc. Queste e molte altre malattie possono essere causate dai radicali liberi (FR): si tratta di agenti ossidanti che hanno un effetto dannoso sul corpo umano. Un radicale è un composto chimico che ha uno o più elettroni spaiati, formati dalla perdita o dall'acquisto di un elettrone.

I composti che possono legare particelle contenenti elettroni spaiati per formare radicali meno attivi o completamente inattivi sono chiamati antiossidanti. La nutrizione è un fattore che determina la salute umana. Le principali fonti di antiossidanti sono gli alimenti origine vegetale. Frutta, verdura e prodotti alimentari da essi derivati contengono un gran numero di sostanze che possono agire come antiossidanti.

La determinazione dell'attività antiossidante (AOA) è molto importante per la medicina, la farmacologia, la produzione alimentare e gli integratori alimentari. Attualmente, il metodo FRAP è ampiamente utilizzato per determinare l’AOA dei prodotti alimentari. Tuttavia, le caratteristiche metrologiche del metodo non sono state stabilite.

Pertanto, l'obiettivo del lavoro era valutare l'accuratezza della determinazione del contenuto totale di antiossidanti nei prodotti alimentari mediante il metodo FRAP con rilevamento potenziometrico.

Il lavoro è stato eseguito utilizzando le attrezzature del Centro ad Uso Condiviso "Centro Analitico Ecologico".

1. Revisione analitica

1 Concetti generali sugli antiossidanti

Attualmente, l'interesse per lo studio dei processi di ossidazione dei radicali liberi è notevolmente aumentato, prima di tutto, in connessione con il riconoscimento del ruolo iniziale dei radicali liberi nel processo di invecchiamento del corpo e nello sviluppo di patologie come malattia ischemica malattie cardiache, aterosclerosi, cataratta, cancro, virus dell'immunodeficienza umana, ecc. È stato inoltre accertato che i radicali liberi, in particolare le specie reattive dell'ossigeno, influiscono anche sul genoma umano, causando una serie di malattie ereditarie autosomiche recessive.

Il corpo è protetto dagli effetti dei radicali dagli antiossidanti (AO). AO - sostanze di varia natura chimica in grado di inibire o eliminare l'ossidazione dei radicali liberi non enzimatici composti organici varie forme ossigeno Nello studio degli antiossidanti, come una delle sostanze biologicamente attive, grande interesse è stato mostrato principalmente da specialisti che lavorano nel campo delle scienze della vita, piuttosto che nell'analisi stessa.

È stato accertato che i radicali liberi, in particolare le specie reattive dell'ossigeno, influiscono sul genoma umano, provocando numerose malattie autosomiche recessive. In un corpo sano viene mantenuto l'equilibrio nel sistema ossidante-antiossidante. La violazione di questo equilibrio a favore degli ossidanti porta allo sviluppo dello stress ossidativo. Come risultato della reazione redox, vengono costantemente generate specie reattive dell'ossigeno con elevata reattività, che causano danni a proteine, acidi nucleici, enzimi, biomembrane, che alla fine portano allo sviluppo di condizioni patologiche. L'esposizione agli antiossidanti crea le condizioni per garantire la normale crescita delle cellule e dei tessuti.

La presenza di antiossidanti nelle cellule fornisce un altro meccanismo molto importante: gli antiossidanti reagiscono rapidamente con i radicali liberi e, sacrificandosi, proteggono dai danni gli elementi più importanti della cellula. I principali antiossidanti sono le vitamine C ed E, nonché i polifenoli, come i flavonoidi, che entrano nell'organismo con il cibo.

Le principali fonti di antiossidanti negli alimenti sono frutta, verdura, tè e vino. Inoltre, il vino rosso contiene più di 200 derivati fenolici conosciuti, come flavonoidi, tannini, ecc. . Molto spesso, lo stress ossidativo è causato dalle radiazioni UV, che non solo provocano l’ossidazione dei radicali liberi, ma interrompono anche il funzionamento degli enzimi antiossidanti della pelle.

2 Sinergismo di antiossidanti

Gli antiossidanti tendono ad avere effetti benefici in grandi dosi. D'altro canto, è noto che la maggior parte dei composti di questo gruppo sono caratterizzati da un'azione bifasica, ovvero Quando un certo valore soglia aumenta, l’effetto antiossidante viene sostituito da uno pro-ossidante. La necessità di utilizzare grandi concentrazioni di antiossidanti si spiega con il fatto che la molecola antiossidante viene distrutta dalla reazione con i radicali liberi e viene eliminata dal gioco. Affinché un antiossidante possa funzionare in modo efficace, è necessario disporre di agenti riducenti che lo trasformino in uno stato attivo. Ad esempio, la vitamina C riduce la vitamina E, ma a sua volta viene ossidata. I composti tiolici ripristinano la vitamina C e i bioflavonoidi ripristinano sia la vitamina E che la vitamina C. La stessa sinergia si osserva tra la vitamina E e il selenio.

Pertanto, il sinergismo funzionale degli antiossidanti ci consente di ottenere il massimo effetto protettivo e un'elevata stabilità del farmaco con una minore concentrazione di antiossidanti. Attualmente sono in corso intense ricerche per studiare l'interazione di vari antiossidanti nel corpo, che consentirà la creazione di composizioni antiossidanti ottimali. Si può prevedere che una persona, risolvendo il problema degli antiossidanti, apparentemente non sarà in grado di inventare nulla di nuovo e sarà costretta ad ammettere che le composizioni uniche create dalla natura non necessitano di miglioramenti.

1.3 Classificazione degli antiossidanti

Attualmente esistono diverse classificazioni di antiossidanti. Di seguito sono riportate le classificazioni più note.

1 Antiossidanti per natura:

Naturale;

-sintetizzati (derivati di antiossidanti naturali).

Secondo il meccanismo d’azione degli antiossidanti:

-“spazzini” che purificano il corpo da tutti i radicali liberi, molto spesso restituendoli a prodotti stabili e inattivi;

-Le “trappole” sono antiossidanti che prendono di mira uno specifico prodotto dei radicali liberi (trappole dell’ossigeno singoletto, radicali idrossilici, ecc.). Le trappole vengono spesso utilizzate per chiarire il meccanismo di una reazione dei radicali liberi;

-Gli antiossidanti terminanti la catena sono sostanze le cui molecole sono più reattive dei loro radicali. Molto spesso si tratta di fenoli, che cedono facilmente i loro elettroni, trasformando il radicale con cui hanno reagito in un prodotto molecolare, mentre loro stessi si trasformano in un debole radicale fenossilico, che non è più in grado di partecipare alla continuazione della reazione a catena .

I più famosi e ampiamente utilizzati nel 20° secolo erano gli antiossidanti sintetici. I rappresentanti più tipici degli antiossidanti sintetici sono: ionolo, fenosani, ossipiridine, selenio inorganico e composti organici del selenio. Tuttavia, recentemente hanno cominciato a cedere il passo agli antiossidanti naturali.

Gli antiossidanti naturali si dividono in:

Enzimatico -catalizzano reazioni in cui le specie reattive dell'ossigeno e alcuni altri agenti ossidanti vengono ridotti a prodotti stabili e non tossici. Gli antiossidanti enzimatici svolgono quasi tutti sempre la loro funzione all'interno della cellula. La loro sintesi e il contenuto intracellulare, come la maggior parte delle proteine, sono sotto controllo genetico e intensificati sotto l'influenza di una serie di influenze esterne, tra cui quelle farmacologiche (introduzione medicinali). L'elevato peso molecolare delle molecole enzimatiche impedisce loro di lasciare le cellule; allo stesso tempo, ciò costituisce anche un ostacolo alla penetrazione nella cellula e agli enzimi e proteine esogeni introdotti nell'organismo sotto forma di farmaci (ad esempio SOD, Cerebrolisina, Actovegin, ecc.). Nel caso degli antiossidanti enzimatici e delle proteine che entrano nel sangue (citolisi delle cellule, somministrazione dall'esterno sotto forma di farmaci), essi non possono essere considerati meccanismi chiave nella protezione antiradicalica e antiperossido del sangue, poiché vengono rapidamente eliminati. entro 5 - 10 minuti, distrutti sotto l'influenza delle proteasi del sangue o vengono escreti immodificati dai reni. Di conseguenza, il livello degli AO enzimatici nel sangue è estremamente basso e in totale determina meno dell'1% della sua attività antiradicalica e antiperossido.

Le proteine macromolecolari sono alcune proteine che sono il componente più importante del siero del sangue. Uno dei rappresentanti tipici degli antiossidanti ad alto peso molecolare è l'albumina sierica. Viene sintetizzato nel fegato e secreto dalle sue cellule nel sangue.

3Basso peso molecolare: il più comune in varie piante.

Gli antiossidanti a basso peso molecolare si dividono in:

Solubile in acqua -acido ascorbico, composti polifenolici naturali (flavonoidi, acidi idrossiaromatici, catecolamine, indolamine, derivati cumarinici, fitoestrogeni, composti tiolici, alcuni oligopeptidi.

Liposolubile -antiossidanti del gruppo vitamina E, vitamine A e K, ormoni steroidei, flavonoidi, polifenoli (ubichinone, vitamina P).

Diamo un'occhiata più in dettaglio agli antiossidanti naturali a basso peso molecolare più comuni.

Vitamina E ( ?-tocoferolo) - è il principale antiossidante delle membrane biologiche dei complessi lipoproteici, protegge il genoma intercettando le specie reattive dell'ossigeno (ROS) nel nucleo cellulare (effetto antimutagenico). Partecipa alla protezione antiossidante delle lipoproteine sieriche, formando un radicale tocoferolo, che viene ridotto a tocoferolo con la partecipazione di acido ascorbico e glutatione; Allo stesso tempo, i radicali vengono trasferiti dalla fase idrofobica del biostrato lipidico alla fase acquosa, che garantisce la costante neutralizzazione dei ROS nelle membrane biologiche.

La molecola di tocoferolo interagisce efficacemente con la maggior parte dei ROS e dei prodotti lipidici a bassa densità (LDL) presenti nella fase lipidica.

Vitamine A, K, ormoni steroidei. Anche la vitamina A e le sue provitamine, beta-carotene e altri carotenoidi, sono antiossidanti fenolici liposolubili. Si trova nel corpo in una delle 3 forme: retinolo, retinale, acido retinoico.

La vitamina A e i suoi derivati presentano un pronunciato effetto antiossidante e garantiscono la distruzione dei principali tipi di ROS; partecipare alla fornitura e alla regolazione dei processi di ossidazione microsomiale, inibire l'attivazione metabolica degli agenti cancerogeni. I principali punti di applicazione dell'azione fisiologica della vitamina A nell'organismo sono la protezione delle membrane biologiche, la sintesi e il metabolismo delle glicoproteine, della cromatina, la biotrasformazione degli xenobiotici, nonché la protezione antiossidante dei fotorecettori retinici e il processo di percezione stesso informazioni visive. La vitamina A e altri carotenoidi interagiscono con altri composti antiossidanti, potenziando e prolungando gli effetti protettivi reciproci: con il selenio - favorisce la riattivazione dei gruppi tiolici nel siero del sangue, ha un pronunciato effetto antitossico; con tocoferolo - riduce drasticamente il contenuto di lipoperossidi aggressivi per la membrana nel siero del sangue e previene la successiva deposizione di prodotti di perossidazione lipidica nell'intima dell'aorta e in altri vasi; in combinazione con una specifica proteina citosolica stimola i processi di crescita e proliferazione cellulare; nel nucleo - migliora l'espressione genetica, la biosintesi dell'acido ribonucleico e delle proteine.

La vitamina A è necessaria per la crescita dei tessuti durante l'infanzia, la fotoricezione e il funzionamento sistema immunitario, aumentando le proprietà barriera e la normale differenziazione dell'epidermide e dell'epitelio delle mucose. Ormoni steroidei - estrogeni e glucocorticoidi, che per questo motivo sono talvolta chiamati antiossidanti strutturali, hanno la capacità di resistere all'eccesso di LPO e, di conseguenza, stabilizzare la struttura delle biomembrane.

Il 2-idrossiestradiolo ha il maggiore effetto antiossidante. Il 17-beta-estradiolo ha un effetto protettivo sull'endotelio vascolare dai danni causati dalle lipoproteine a bassa densità (LDL) o dalla lisofosfatidilcolina. Inoltre, gli estrogeni inibiscono efficacemente i sistemi di perossidazione lipidica dipendenti dalla nicotinammide adenina dinucleotide (NADPH) e dall’ascorbato nei microsomi e aumentano l’attività della catalasi nelle cellule renali. A dosi elevate, l'idrocortisone riduce l'LPO e il desossicorticosterone a dosi elevate lo intensifica.

L'ubichinone (coenzima Q) - (onnipresente) - è strutturalmente vicino alla vitamina E ed è simile ad essa in azione e attività. Forma il sistema redox ubichinone-ubichinolo. La maggior parte dell'ubichinone intracellulare si trova nei mitocondri, nel nucleo, nel reticolo endoplasmatico e nei lisosomi.

Il ruolo più importante dell'ubichinone intracellulare è associato alla partecipazione alla catena di trasporto degli elettroni mitocondriali nella catena respiratoria, che determina la sua azione come regolatore dell'omeostasi antiossidante nella cellula.

L'ubichinone e i suoi analoghi inibiscono efficacemente il radicale anionico superossido, il radicale idrossile, i radicali perossido e alcossilici e, inoltre, intercettano i radicali tocoferolo (vitamina E) e sono uno dei principali inibitori sierici dell'ossigeno singoletto.

I composti antiossidanti idrofobici liposolubili svolgono un ruolo dominante nella protezione dei principali componenti strutturali delle membrane biologiche, fosfolipidi o proteine incorporati nello strato lipidico.

1.4 Metodi di ricerca sugli antiossidanti

l'attività antiossidante è classificata: secondo metodi di registrazione degli AOA manifestati (volumetrico, fotometrico, chemiluminescente, fluorescente, elettrochimico); per tipologia di fonte di ossidazione; per tipo di composto da ossidare; mediante il metodo di misurazione del composto ossidato.

Tuttavia, i metodi più noti per determinare l’attività antiossidante sono:

TEAC (capacità antiossidante equivalente trolox): il metodo si basa sulla seguente reazione:

Metmioglobina + H 2DI 2?Ferrilglobina +ABTS?ABTS*+AO.

Il metodo degli equivalenti Trolox (TEAC) si basa sulla capacità degli antiossidanti di ridurre i cationi radicali 2,2 -azinobis (ABTS) e quindi inibiscono l'assorbimento nella parte dello spettro a lunghezza d'onda lunga (600 nm). Uno svantaggio significativo del metodo è la reazione in due fasi per produrre il radicale. Ciò allunga il tempo di analisi e può aumentare la dispersione dei risultati, nonostante per l'analisi venga utilizzato un set standardizzato di reagenti.

FRAP (potere antiossidante ferrico riducente): il metodo si basa sulla seguente reazione:

Fe(III)-Tripiridiltriazina+AO?Fe(II)-Tripiridiltriazina.

Capacità riducente/antiossidante del ferro (FRAP). La reazione qui utilizzata è la riduzione della Fe(III)-tripiridiltriazina a Fe(II)-tripiridiltriazina. Tuttavia, questo metodo non può determinare la determinazione di alcuni antiossidanti, come il glutatione. Questo metodo consente la determinazione diretta degli antiossidanti a basso peso molecolare. A pH basso, la riduzione del complesso Fe(III)-tripiridiltriazina nel complesso Fe(II) è accompagnata dalla comparsa di un colore blu intenso. Le misurazioni si basano sulla capacità degli antiossidanti di sopprimere l'effetto ossidativo delle specie di reazione generate nella miscela di reazione. Questo metodo è semplice, veloce ed economico da implementare.

ORAC (capacità di assorbimento dei radicali dell'ossigeno): il metodo si basa sulla seguente reazione:

(II)+H 2O 2?Fe(III) + OH*+AO?OH* + Luminolo.

Determinazione della capacità di assorbimento dei radicali dell'ossigeno (ORAC). Con questo metodo viene registrata la fluorescenza di un substrato (ficoeritrina o fluoresceina), che si forma a seguito della sua interazione con i ROS. Se il campione di prova contiene antiossidanti, si osserva una diminuzione della fluorescenza rispetto al campione di controllo. Questo metodo è stato originariamente sviluppato dal Dr. Guohua Kao presso il National Institute on Aging nel 1992. Nel 1996, il Dr. Kao ha collaborato con il Dr. Ronald Pryer in un gruppo congiunto presso il Centro di ricerca sull'invecchiamento dell'USDA, dove il metodo semi-automatizzato è stato sviluppato creato.

4 TRAP (parametro antiossidante di intrappolamento totale dei radicali): il metodo si basa sulla seguente reazione:

AO?AAPH* + PL (PE).

Questo metodo sfrutta la capacità degli antiossidanti di interagire con il radicale perossilico 2,2 - azobis(2-ammidinopropano) dicloridrato (AAPH). Le modifiche TRAP consistono in metodi per la registrazione del segnale analitico. Molto spesso, nella fase finale dell'analisi, il radicale perossidico AAPH interagisce con un substrato luminescente (luminolo), fluorescente (diclorofluoresceina diacetato, DCFH-DA) o altro substrato otticamente attivo.

Il derivato idrosolubile della vitamina E Trolox (acido 6-idrossi-2,5,7,8-tetrametilcroman-2-carbossi) viene utilizzato come standard per i metodi TEAC, ORAC e TRAP.

Recentemente è aumentato l’interesse per l’uso di metodi elettrochimici per valutare l’attività antiossidante. Questi metodi hanno un'elevata sensibilità e un'analisi rapida.

La valutazione dell'attività antiossidante di alcuni prodotti alimentari viene effettuata mediante il metodo del potenziometro, basato sullo sfruttamento della proprietà delle sostanze antiossidanti di partecipare alle reazioni redox dovute ai gruppi enolo (-OH) e sulfidrile (-SH).

La determinazione delle proprietà antiossidanti delle soluzioni si basa sull'interazione chimica degli antiossidanti con il sistema mediatore, che porta a un cambiamento nel suo potenziale redox. Una cella elettrochimica è un contenitore contenente una soluzione tampone K-Na-fosfato, un sistema mediatore Fe(III)/Fe(II) e un elettrodo complesso prima di misurare il potenziale redox. L'attività antiossidante è valutata in g-eq/l.

Il metodo amperometrico per determinare l'attività antiossidante si basa sulla misurazione della corrente elettrica che si verifica durante l'ossidazione della sostanza in esame sulla superficie dell'elettrodo di lavoro, che si trova sotto un certo potenziale. La sensibilità del metodo amperometrico è determinata sia dalla natura dell'elettrodo di lavoro che dal potenziale ad esso applicato. Il limite di rilevazione del rilevatore amperometrico di polifenoli e flavonoidi è a livello di nano-picogrammi; a concentrazioni così basse vi è una minore probabilità di influenza reciproca di diversi antiossidanti quando sono presenti insieme, in particolare la manifestazione del fenomeno della sinergia . Gli svantaggi del metodo includono la sua specificità: in queste condizioni, gli antiossidanti che sono ossidati o ridotti nella regione dei potenziali di elettroriduzione dell'ossigeno non possono essere analizzati. I vantaggi del metodo includono la velocità, la prostata e la sensibilità.

Metodo coulometrico galvanostatico che utilizza ossidanti generati elettricamente: il metodo è applicabile per l'analisi degli antiossidanti liposolubili.

Sviluppato vari modi definizioni di acido ascorbico:

-metodo amperometrico utilizzando un elettrodo di alluminio modificato con un film di nichel (II) esacianoferrato mediante semplice immersione in una soluzione;

-un metodo per la determinazione spettrofotometrica e visiva in fase solida dell'acido ascorbico utilizzando xerogel di acido silicico modificato con reagente Wawele e rame (II) come polvere indicatrice;

-la determinazione chemiluminescente dell'acido ascorbico può essere effettuata mediante il metodo dell'iniezione a flusso utilizzando la reazione chemiluminescente della rodamina B con cerio (IV) in un mezzo di acido solforico.

-determinazione dell'acido ascorbico nell'intervallo 10 -8-10-3 g/cm 3mediante voltammetria anodica in mezzi acquosi e acquoso-organici.

Il più comune è il metodo FRAP, poiché è rapido e altamente sensibile. Negli ultimi decenni sono stati sviluppati numerosi metodi per determinare l’attività antiossidante utilizzando il metodo FRAP (Tabella 1).

Tabella 1 -Sviluppo del metodo FRAP e sua applicazione per determinare l'attività antiossidante di vari oggetti

Autori e linkYearReagentX st Oggetti di analisiNoteBenze, Strain 1996TPTZFe(II)plasma sanguigno=4min. Sono state studiate la stechiometria della reazione e l'additività. Benzie, Strain 1999TPTZFe(II),AKTea, wineDeterminazione degli AOA causati dai polifenoliBenzie, Szeto 1999TPTZFe(II)TeaI valori AOA di diverse varietà di tè sono stati confrontati con Pulido, Bravo,Saura-Calixcon2000TPTZFe( II)Soluzioni modellot=30 min. È stata rilevata l'influenza di un solvente non acquoso Arya, Jain, Mahajan 2002 DPAACPplantsKleszczwsky, Kleszczwska 2002DIPABlood,issuePIA metodo. È stata testata l'influenza di sostanze estranee Firuzi, Lacanna, Petrucci e.a. 2004TPTZFe(II) Soluzioni modello La sensibilità della determinazione di diversi AO è stata studiata in funzione della loro struttura e del potenziale redox Katalinic, Milos, Modun e.a. 2004TPTZCTVari viniTemerdashev, Tsyupko et al.2006DIP, PHENACModel mixingt=60minLoginova, Konovalova 2007DIP-Medicines. Preparazioni Metodo di prova Temerdashev, Tsyupko et al.2008 PHENAC Vini rossi secchi Correlazione di AOA con altri indicatori di qualità del vino Continuazione della tabella 1Berker, Guclu, Demirata, Apak2010FZFe (II) Miscele modello La sensibilità della determinazione di diversi AOVershinin, Vlasova, Tsyupko2010DIP, PHENAC Sono state studiate le miscele modello La non additività del segnale con una mancanza di agente ossidante Anisimovich, Deineka et al.2010DIPFe(II) Soluzioni modello Vengono proposti parametri cinetici per la valutazione dell'AOA.

Note: convenzionalmente designato: analisi FIA-flow injection, TPTZ-tripiridiltriazina, DIP-2,2 ,-dipiridile, PHEN-o-fenantrolina, acido DPA-piridina dicarbossilico, FZ-ferrozina, acido AA-ascorbico, KT-catecolo, tempo di esposizione t, min.

5 Proprietà antiossidanti di alcuni alimenti

Attualmente sono state identificate proprietà antiossidanti in molti alimenti. Esempi di tali prodotti sono:

-agrumi;

-varie varietà di mele;

-stevia e suoi prodotti trasformati;

-vari tipi di pane;

-chicchi d'orzo, avena, sorgo, riso e loro prodotti trasformati;

Tè;

Caffè;

-vari tipi di vini, ecc.

Proprietà antiossidanti degli agrumi.I più famosi e ampiamente utilizzati nel 20° secolo erano gli antiossidanti sintetici. Tuttavia, recentemente hanno cominciato a cedere il passo agli antiossidanti naturali. I ricercatori sono sempre più interessati agli antiossidanti contenuti sistemi alimentari. Uno di questi sistemi che presenta le proprietà dell'AO sono gli agrumi, a causa della presenza di numerosi componenti specifici nella loro composizione.

Sostanze a maggiore attività antiossidante presenti nei succhi d'arancia: isperedina, narirutina, pentametossiflavone, esametossiflavone, naringina, acido benzoico. La rutina e la quercetina hanno un significativo effetto inibitorio sull'ossidazione delle lipoproteine a bassa densità, riducendo così il rischio di aterosclerosi.

La capacità antiossidante degli agrumi è associata alla presenza di acido ascorbico. La pastorizzazione termica aumenta la velocità di decomposizione acido ascorbico e di conseguenza aumenta la perdita di attività antiossidante. La più alta attività contro i radicali, così come contenuto più alto sostanze responsabili -gli antociani, gli acidi ascorbico, sinapico, caffeico, ferrulico, cumarico si trovano nei succhi d'arancia appena spremuti. Concentrare e pastorizzare i succhi riduce significativamente la quantità sostanze utili e riduce l'attività antiossidante di 1,5-2 volte. Non solo il succo d’arancia stesso è una fonte di sostanze antiossidanti, ma anche i prodotti trasformati a base di arancia possono presentare proprietà antiossidanti.

Proprietà antiossidanti di diverse varietà di mele.La ricerca ha dimostrato che il succo delle varietà di mele estive Malt e Montene ha valori FRAP più elevati rispetto al succo di tre varietà di mele autunnali. La polpa di mela presenta un AOA maggiore rispetto al succo. Il concentrato del succo delle varietà di mele autunnali, secondo i risultati dei test con il metodo FRAP, lo è miglior antiossidante che dal succo delle varietà di mele estive. La determinazione dell'attività chelante è ampiamente utilizzata anche per studiare le caratteristiche antiossidanti dei sistemi alimentari.

Tra tutti i metalli gioca il ferro ruolo vitale nel processo di ossidazione dei lipidi grazie alla sua elevata attività. La transizione bivalente degli ioni metallici catalizza i processi ossidativi, poiché porta alla formazione di radicali idrossilici. La polpa di mela, come nel determinare l'AOA utilizzando il metodo FRAP, ha un'attività chelante maggiore rispetto al succo. Tuttavia, il concentrato di mela ottenuto dal succo delle varietà di mele estive, secondo il metodo FIC, è più attivo rispetto al succo delle varietà di mele autunnali.

Per le mele e i concentrati di mele, i valori AOA determinati con il metodo FRAP sono 2-5 volte superiori ai valori FRAP per i vini rossi, 4-10 volte superiori -Per oli vegetali e sono al livello degli indicatori per piante medicinali.

Proprietà antiossidanti dei chicchi di orzo, avena, sorgo, riso e loro prodotti trasformati.La crusca di grano è molto più ricca di antiossidanti rispetto al grano stesso e al suo endosperma; la crusca contiene principalmente due classi di sostanze antiossidanti: antociani e acidi fenolici, il loro contenuto diminuisce notevolmente quando il chicco è esposto al calore. Il contenuto di antiossidanti dipende in gran parte dal genotipo e dalla varietà della pianta, nonché dalle sue condizioni di crescita.

Studiando l'influenza della composizione chimica e dell'attività antiossidante sulla capacità di eliminare i radicali liberi e ridurre il ferrocianuro per 10 varietà di orzo e il malto da esso ottenuto, si è riscontrato che il contenuto totale di sostanze fenoliche e il potere riducente sono più elevati per malto, il contenuto di flavan-3-oli è maggiore per l'orzo. La capacità di eliminare i radicali liberi è determinata dalla varietà di orzo.

Non solo l’orzo stesso, ma anche i suoi prodotti trasformati – le bucce d’orzo – possono essere utilizzati come fonte di sostanze antiossidanti. Il peeling riduce le capacità 2.2 ,-difenil-1-picrilidrazil legano i radicali liberi. Il prodotto di crusca d'avena più efficace in termini di indice antiossidante è stato ottenuto mediante irradiazione con microonde ad una temperatura di 150 gradi.

L’aggiunta di farina d’orzo al pane ne aumenta la capacità antiossidante. Durante la cottura la quantità di fenoli liberi diminuisce e si lega - aumenta.

L'attività antiradicalica del sorgo è più efficace di quella del frumento o dell'orzo. La crusca di sorgo è più ricca di antiossidanti rispetto al grano; Il sorgo più attivo è quello del raccolto 1999.

I chicchi d'orzo contengono la maggiore quantità di minerali. Ma il chicco di sorgo ha gli indicatori più alti per il contenuto totale di sostanze fenoliche e attività antiossidante. In ordine decrescente di attività antiradicalica, le colture di grano sono state organizzate come segue: sorgo>miglio>segale>orzo>grano duro>grano tenero. Secondo gli indicatori studiati, i chicchi di piccole e grandi dimensioni sono quasi gli stessi; le varietà di riso nero hanno antiossidanti più forti di quelle bianche.

Negli ultimi anni sono stati effettuati lavori per introdurre vari tipi di cereali nella composizione dei prodotti da forno e dolciari.

Trattamento termico riduce significativamente tutti gli indicatori antiossidanti. I fattori ambientali alterano l’attività antiossidante della crusca a vari livelli. La più alta attività antiossidante si osserva per piccole frazioni di crusca.

1.6 Valutazione degli indicatori di precisione (ripetibilità e riproducibilità) e accuratezza della tecnica di analisi

Presupposti di base all'interno del modello adottato e Requisiti generali per condurre l'esperimento:

Si presuppone che la distribuzione dell'errore casuale del risultato dell'analisi (analisi singola) sia normale.

Distribuzione dei non esclusi errore sistematico i metodi di analisi sono accettati come normali.

I fattori che influenzano il campione non hanno un effetto significativo sull'errore dei risultati dell'analisi.

I campioni da valutare (ES) vengono selezionati in modo tale che il contenuto del componente determinato dell'ES consenta di coprire l'intervallo di misurazione previsto dal metodo.

La composizione generale dell'OO corrisponde all'ambito di applicazione della metodologia. In generale, il numero di OO è almeno cinque.

Gli OO sono stabili durante l'esperimento. Altrimenti, l'instabilità dell'OO viene presa in considerazione nel calcolo dell'indicatore di precisione

L'OO è selezionato in modo tale che l'errore associato alle variazioni del contenuto dei componenti nei campioni di questo OO sia trascurabile rispetto alla ripetibilità della tecnica di analisi, altrimenti sarà uno dei fattori che influenzano la precisione dell'analisi .

Il design dell'esperimento soddisfa le condizioni di riproducibilità. A questo scopo l'RO viene inviato a L laboratori, ciascuno dei quali riceve N risultati di una singola analisi in condizioni di ripetibilità. La scelta del numero di laboratori e del numero di risultati di una singola analisi di ciascun OO viene effettuata in conformità con RMG 61-2003. Quando si sceglie il numero di laboratori e una singola analisi, viene preso in considerazione l'errore nella stima della deviazione standard della riproducibilità.

Applicazione - In conformità con GOST R ISO 5725-2, "laboratorio" indica una combinazione di fattori quali "operatore", "attrezzatura" e "luogo di misurazione". Un laboratorio nel senso generalmente accettato del termine è più “laboratori” se può comprendere più operatori, ognuno dei quali ha il proprio posto di lavoro con una serie di attrezzature e le condizioni in cui eseguono il lavoro.

Tenendo conto della RMG 61-2003, l'ottenimento dei risultati di una singola analisi è organizzato in conformità ai seguenti requisiti:

Gli strumenti di misura specificati nel documento sul metodo di analisi sono stati verificati (calibrati).

Ciascun gruppo di N risultati da una singola analisi è stato ottenuto in base a condizioni di ripetibilità, vale a dire in un breve intervallo di tempo e dallo stesso operatore utilizzando la stessa vetreria volumetrica, gli stessi reagenti. Strumenti di misura.

Un gruppo di risultati N da una singola analisi di diversi OO in un laboratorio può essere ottenuto in giorni diversi, ma sempre dallo stesso operatore. Se un operatore non riesce ad analizzare completamente tutti gli TOE, viene sostituito da un altro operatore durante l'analisi di un altro TOE. In questo caso, un operatore riceve N risultati di una singola analisi di un oggetto.

Ciascun laboratorio deve avere una persona designata responsabile dell'organizzazione dell'effettiva esecuzione dell'esperimento.

Per valutare la ripetibilità della tecnica di analisi, calcolare la media aritmetica e la varianza del campione risultati di una singola analisi del contenuto dei componenti nell'm-esimo OO, ottenuti in condizioni di ripetibilità (determinazioni parallele):

, (1)

X I l - risultato della misurazione;

N è il numero di misurazioni.

, (2)

Dove -varianza campionaria dei risultati dell'analisi unitaria;

-media.

Sulla base dei valori ottenuti delle varianze campionarie nell'm-esimo OO, l'ipotesi sull'uguaglianza delle varianze generali viene testata utilizzando il criterio di Cochran.

Valore G massimo calcolato utilizzando la formula e confrontato con G tavolo per il numero di gradi di libertà , corrispondente al numero di varianze sommate, e la probabilità di confidenza accettata P = 0,95.

max è il valore massimo delle varianze del campione di una singola analisi.

Se Gmax > Gtabella, allora quello corrispondente viene escluso da ulteriori calcoli e la procedura viene ripetuta fino al valore successivo più grande, ecc. finché Gmax diventa inferiore o uguale a Gtabella.

Quelli non esclusi dai calcoli sono considerati omogenei e da essi si stima la deviazione standard (RMS), che caratterizza la ripetibilità del risultato di una singola analisi (determinazioni parallele) ottenuta per il contenuto corrispondente al contenuto del componente nel m- esimo OO. L'indicatore di ripetibilità della tecnica di analisi sotto forma di deviazione standard viene calcolato utilizzando la formula:

dove? è la somma delle varianze campionarie di una singola analisi;

L è il numero di ripetizioni della misurazione.

L'indicatore di ripetibilità della tecnica di analisi sotto forma di limite di ripetibilità r per il contenuto corrispondente al contenuto del componente nell'm-esimo OO viene calcolato utilizzando la formula:

dove n è il numero di determinazioni parallele previste dalla metodologia per ottenere il risultato dell'analisi,

Q (P, n) =2,77 a n=2, P=0,95

Q (P, n) =3,31 a n=3, P=0,95

Q (P, n) =3,63 a n=4, P=0,95

Q (P, n) =3,86 a n=5, P=0,95

Per valutare l'indicatore di riproducibilità di una tecnica di analisi, calcolare il valore medio complessivo dei risultati dell'analisi ottenuti in condizioni di riproducibilità e la dispersione che caratterizza la diffusione dei risultati medi aritmetici di una singola analisi () rispetto al valore medio complessivo:

dove?Xi è la somma dei risultati della media aritmetica di una singola analisi.

L'indicatore di riproducibilità della tecnica di analisi sotto forma di deviazione standard per i contenuti corrispondenti al contenuto del componente nell'm-esimo OO viene calcolato utilizzando la formula:

L'indicatore di riproducibilità della tecnica di analisi sotto forma di limite di riproducibilità R per i contenuti corrispondenti al contenuto del componente nell'm-esimo OO viene calcolato utilizzando la formula:

R = Q (P, 2) (9)

2. Parte sperimentale

1 Reagenti iniziali, materiali e attrezzature utilizzate

RN-ionometro "Ecotest-120".

Stufa elettrica domestica secondo GOST 14919-83.

Elettrodo combinato al platino.

Bilancia da laboratorio VLR-200, 2 classi di precisione TU 25-06-1131-75.

Matracci con capacità di 25, 50, 100, 250, 500 cm 3, 2 classi di precisione secondo GOST 1770-74.

Pipette con capacità di 1, 2, 5, 10 cm 3, 2 classi di precisione secondo GOST 20292-74.

Bottiglie di vetro con capacità di 100, 250, 500 cm3 .

Bicchieri chimici con capacità 50 e 100 cm 3 secondo GOST 1770-74.

Esacianoferrato di potassio (II), imp.

Esacianoferrato di potassio (III), imp.

Sodio fosfato disostituito, grado analitico

Fosfato di potassio monosostituito, grado analitico

Acido ascorbico, imp.

Catecolo, imp.

Quercetina secondo TU 6-09-10-745-78.

Acido gallico, imp.

Alcool etilico rettificato secondo GOST 5962-67.

Acqua distillata secondo GOST 6709-72.

2.2 Preparazione delle soluzioni di lavoro

2.1 Preparazione della soluzione K 3con una concentrazione di 1 mol/dm3

Su una bilancia analitica si pesano 8,23125 g K 3con una concentrazione di 0,01 mol/dm3

Su una bilancia analitica si pesano 0,10555 g K 4con un errore di 0,00025 g, trasferire in un matraccio tarato da 100 cm 3e portare il volume alla tacca con acqua distillata.

2.3 Preparazione della soluzione tampone fosfato K-Na con una concentrazione di 0,015 mol/dm3 (pH=7,4)

Mescolare 496,8 cm 3soluzione A e 193,2 cm3 soluzione B.

Preparazione della soluzione A:Su una bilancia analitica si pesano 13,71900 g di Na 2HPO 4*2H 2O (Mr=177,99 g/mol), trasferire in un matraccio tarato da 500 cm 3e portare il volume alla tacca con acqua distillata.

Preparazione della soluzione B:Su una bilancia analitica si pesano 2,26950 g di KH 2P.O. 4(Mr=136,09 g/mol), trasferire in un matraccio tarato da 250 cm 3e portare il volume alla tacca con acqua distillata.

2.4 Preparazione di una soluzione di lavoro di acido ascorbico con una concentrazione di 0,1 mol/dm3

Pesare su una bilancia analitica 1,76 g di acido ascorbico e trasferirlo in un matraccio tarato da 100 cm. 3e portare il volume alla tacca con acqua distillata.

2.2.5 Preparazione di una soluzione di lavoro di acido ascorbico con una concentrazione di 0,01 mol/dm3

Soluzione di acido ascorbico con una concentrazione di 0,01 mol/dm 3preparato diluendo una soluzione di lavoro di acido ascorbico con una concentrazione di 0,1 mol/dm 3in un pallone della capacità di 100 cm3

2.6 Preparazione di una soluzione di lavoro di acido gallico con una concentrazione di 0,1 mol/dm3

Pesare su una bilancia analitica 0,01 g di acido gallico e trasferirlo in un matraccio tarato da 100 cm. 3e portare il volume alla tacca con acqua distillata.

2.7 Preparazione di una soluzione di lavoro di acido gallico con una concentrazione di 0,001 mol/dm3

Soluzione di acido gallico con una concentrazione di 0,001 mol/dm 3preparato diluendo una soluzione di lavoro di acido gallico con una concentrazione di 0,1 mol/dm 3in un pallone della capacità di 100 cm3 .

2.8 Preparazione di una soluzione di lavoro di catecolo con una concentrazione di 0,1 mol/dm3

Pesare su bilancia analitica 1,1011 g di catecolo e trasferirli in un matraccio tarato da 100 cm. 3e portare il volume alla tacca con acqua distillata.

2.9 Preparazione di una soluzione di lavoro di catecolo con una concentrazione di 0,01 mol/dm3

Soluzione di catecolo con una concentrazione di 0,01 mol/dm 3preparato diluendo una soluzione di lavoro di catecolo con una concentrazione di 0,1 mol/dm 3in un pallone della capacità di 100 cm3 .

2.2.10 Preparazione di una soluzione di lavoro di quercetina con una concentrazione di 0,1 mol/dm3

Pesare su una bilancia analitica 0,01120 g di quercetina e trasferirli in un matraccio tarato da 100 cm3. 3e portare a volume con alcool etilico.

2.11 Preparazione di una soluzione di lavoro di quercetina con una concentrazione di 0,01 mol/dm3

Soluzione di quercetina con una concentrazione di 0,01 mol/dm 3preparato diluendo una soluzione di lavoro di quercetina con una concentrazione di 0,1 mol/dm 3in un pallone della capacità di 100 cm3 alcol.

2.12 Preparazione di un campione di tè per l'analisi

La preparazione del campione viene effettuata in conformità con GOST 19885-74. In un pallone da 250 cm vengono posti 2,5 g di un campione di tè premacinato, prelevato da un campione medio, con un errore di pesatura non superiore a 0,0002 g 3, aggiungere 200 cm 3far bollire l'acqua distillata e adagiarla bagnomaria. L'estrazione viene effettuata per 45 minuti. L'estratto viene filtrato in un pallone da 500 ml 3, il filtrato viene trasferito in un matraccio tarato da 250 cm3 3, raffreddare e diluire con acqua distillata fino a volume.

3 Metodologia per eseguire l'analisi

In un bicchiere di vetro della capacità di 50 cm 3contribuito 19,6 cm 3Soluzione tampone fosfato K-Na (pH=7,4), quindi aggiunti 0,2 cm 3 soluzione k 3e la soluzione K 4. Un elettrodo è stato immerso nella cella e il sistema è stato mantenuto fino a quando non è stato stabilito il valore del potenziale, che è stato poi considerato il valore iniziale e indicato con E. Successivamente sono stati aggiunti n ml dell'oggetto in prova e il potenziale è stato misurato in tempi diversi (t da da 0,5 minuti a 60 minuti). L'attività degli antiossidanti in soluzione è stata calcolata secondo la formula:

=(?*Cox-Cred)/1+? , (11)

dove E, E 1-potenziali stabiliti nel sistema prima e dopo l'introduzione della fonte analizzata di antiossidante, V;

E 0- potenziale standard del sistema mediatore, V;

CON OH -concentrazione della forma ossidata del mediatore, mol eq./dm3 ;

CON rosso -concentrazione della forma ridotta del mediatore, mol equiv./dm3 ;

Concentrazione equivalente X di antiossidanti che hanno interagito con il componente ossidato del sistema mediatore, mol equiv./dm3 ;

?=10(E-E1)/b CON rosso /Sokh ,b=2,3RT/nF,n=1.

Durante l'analisi, la forza ionica della soluzione praticamente non cambia e la fonte dell'informazione è la variazione di potenziale, e non il suo valore assoluto; è del tutto corretto non fare differenza tra attività e concentrazione. Inoltre, questo valore viene utilizzato per caratterizzare l'attività antiossidante.

3. Risultati e discussioni

È noto un metodo potenziometrico per determinare l'attività antiossidante, che presenta numerosi vantaggi. A differenza della maggior parte dei metodi per determinare l'AOA, non viene utilizzata una sostanza standard.

Tuttavia, in potenziometria l'entità del salto potenziale è importante, quindi sono state poste le seguenti domande:

Determinare l'AOA in un momento prestabilito o attendere che si stabilisca un potenziale costante?

Cosa caratterizza il valore AOA determinato con questo metodo o il contenuto totale di antiossidanti?

Oggetto dello studio sono stati gli antiossidanti – di tipo fenolico con diverse strutture – acido gallico (GA), quercetina (QU) e catecolo (CT); e antiossidanti non fenolici - acido ascorbico (AA). Questi singoli antiossidanti si trovano nei prodotti alimentari e ne determinano le proprietà antiossidanti (Figura 1).

Figura 1 - Struttura degli oggetti di ricerca

Per risolvere queste domande, abbiamo studiato la dipendenza dal tempo della variazione di potenziale nel sistema redox antiossidante Fe(II)/Fe(III). In tutti i casi è stato utilizzato come indicatore il sistema K 3/K 4con un rapporto di concentrazione Fe(II)/Fe(III) di 1:100.

Condizioni per determinare l'AOA:

-19,6 cm 3Tampone fosfato K-Na, pH=7,4;

-0,2 cm 3con una concentrazione di 1 mol/dm3 ;

-0,2 cm 3con una concentrazione di 0,01 mol/dm3 ;

-come elettrodo funzionante - NPO combinato in platino "Measuring Technology IT";

-ncm 3campione o agente riducente;

-t da 0,5 min a 60 min.

Il potenziale iniziale del sistema si è stabilito entro 3-5 minuti ed è rimasto praticamente invariato per un'ora. Abbiamo studiato la variazione di potenziale nell'arco di 60 minuti con un intervallo di 1 minuto per i primi 10 minuti e di 10 minuti nel periodo di tempo successivo.

Considerando le dipendenze ottenute, è stato stabilito che, indipendentemente dall'entità del salto potenziale, si osserva il suo aumento nel tempo (Figura 2).

Figura 2 – Grafici di ?E rispetto al tempo per vari antiossidanti

La variazione di potenziale dipende dalla natura dell'antiossidante, quindi per AA l'aumento del segnale è di circa il 92% in 15 minuti, mentre per QD alle stesse concentrazioni nel sistema questo valore è di circa l'80% (Tabella 2).

Tavolo 2 -Il valore di diversi antiossidanti in momenti diversi

Vos-lS, mmol/dm 3?E per 3 min, mV?E per 5 min, mV?E per 15 min, mVAK0.0249.39.510.7AK0.09924.424.626.0AK0.38052.352.555.0GK0.07034.434.635.2GK0.12044.345.047, 5GK0. 24064.965. 768.6KV0.01012.813.013.8KV0.02021.922.524.3KV0.05044.445.247.1KT0.10029.531.839.9KT0.15040.944.254.0KT0.24051.2 54.665,8 Quando sono state introdotte nel sistema concentrazioni uguali (in equivalenti molari) di antiossidanti di diversa natura, sono stati ottenuti cambiamenti nel potenziale del sistema indicatore dopo l'introduzione di antiossidanti di diversa entità. Il “tasso” di variazione del valore?E per tutti gli antiossidanti in tutti i casi è lineare. Il “tasso” di variazione di questa quantità aumenta nelle serie CV<АК<ГК<КТ (рисунок 4).

GKy=0,2711x+32,815KTy=0,7643x+28,681AKy=0,0779x+24,506KVy=0,0261x+12,905 Figura 4 -Grafico della dipendenza di ?E dal tempo alla stessa concentrazione di agente riducente

Il “tasso” di variazione potenziale nel tempo per le miscele (ad esempio, AA + HA) di agenti riducenti è lineare, ma il valore è inferiore a quello teorico (Figura 5). Errore relativo non superiore al 30%.

Figura 5 - Grafico della dipendenza dell'?E dal tempo per la miscela di AA + HA

I risultati dei valori ?E delle miscele antiossidanti sono presentati nella Tabella 3.

Tabella 3 - Risultati dei valori?E delle miscele di antiossidanti

Cao, moleq/l?E pratico ,mV?E teoria ,mV|?|,%GCAKKTKV0,000150,0001--39,158,636,180,00030,0001--51,372,430,390,00070,00015--66,861,334,090,00015-0,0001-40,463,120, 440.0003-0.0001-52.586.529.83-0, 00010.0001- 85.517, 89 --0.00050.000270.292.720.28

Il potenziale di crescita è stato calcolato per tutti gli antiossidanti e per il campione reale. Come tempo di controllo sono stati utilizzati 15 minuti. Come si vede, per tutti gli antiossidanti il potenziale raggiunge circa il 99% del massimo (Tabella 4).

Una variazione del potenziale porta ad un aumento del valore AOA calcolato. Per l'indicatore totale, che è il valore AOA, è necessario selezionare le condizioni in cui il contributo dei vari antiossidanti individuali al valore totale sarà massimo.

Tabella 4 -Cambiamento del segnale analitico nel tempo

t,min?,%AKGKKVKTVINO399,498,999,196,699,0599,599,199,497,298,6

Al tempo fisso selezionato di 5 minuti, è stato calcolato "AOA". Come si può vedere, l'errore nel determinare la concentrazione dei singoli agenti riducenti è del 12% per AA, 37% per CV, 21% per HA e 9% per CT (Tabella 5).

Tabella 5 – Metodo di inserimento dei singoli antiossidanti

AOV introdotto, mEq/lTrovato, mEq/l?,%AK0.1890.16712.0AK0.1220.10215.7AK0.2960.2689.0KT0.1390.12212.0KT0.1980.2105.8GK0.3700.45623.4GK0, 7320.96 832.3GK0.2080.2257.4KV0.0490.06735.2KV0. 0980.13639.2

Inoltre, sono state studiate miscele di antiossidanti in vari rapporti di concentrazione ed è stato calcolato il valore AOA (Tabella 6).

Tabella 6 – Metodo di inserimento delle miscele antiossidanti

Composizione della miscelaIntrodotto, mMeq/lTrovato, mMeq/l?,%AA+HA0.20.336.00,40.647.50.91.130.6HA+KT0.20.444.00,40.657.5KT+AA0.20.220.00.30.310.00.60.713,3KV+KT0.60 ,720,0

Pertanto, possiamo dire che in queste condizioni sperimentali i valori di AOA e contenuto di antiossidanti sono probabilmente vicini. E il valore determinato caratterizza l'attività dei componenti, ad es. Questo è AOA. Utilizzando i vini come esempio, i valori AOA sono stati calcolati in un momento fisso selezionato. Come puoi vedere, i valori dell'oggetto reale differiscono dell'8%. Pertanto, per poter confrontare i valori di AOA di diversi vini, è necessario effettuare la determinazione in un momento prestabilito (Tabella 7).

Tabella 7 – Risultati della determinazione dell'AOA del vino

Vino AOA, mEq/l3 min5 min15 minMerlot NR0,135±0,0020,147±0,0040,176±0,002

Per verificare la correttezza della determinazione dell'AOA dei prodotti alimentari mediante il metodo FRAP con rilevamento potenziometrico, sono stati calcolati gli indicatori di precisione secondo RMG 61-2003. Per ciascun campione, sono state ottenute 10 determinazioni AOA coerenti in condizioni di precisione in laboratorio (Appendice A), ciascuna delle quali rappresenta la media di due determinazioni parallele (Tabella 8).

Tabella 8-Caratteristiche metrologiche

Nome del componente determinato Prodotto alimentare Indice di ripetibilità (RMSD di ripetibilità),% Limite di ripetibilità (per 2 risultati di determinazioni parallele),% rIndicatore di riproducibilità (RMS di riproducibilità),% Limite di riproducibilità (per 2 risultati di misurazione), % Rcontenuto totale di antiossidanti Vino "Caber-net" Fanagoria 719123 Tè "Kras-nodarsky" 411313

Conclusione

È stata valutata l'accuratezza della determinazione del contenuto totale di antiossidanti nei prodotti alimentari mediante il metodo FRAP con il sistema del mediatore K 3/K 4con rilevamento potenziometrico.

2Sulla base di dati letterari e sperimentali, è stato dimostrato che l'accuratezza della determinazione potenziometrica del contenuto di antiossidanti con il sistema mediatore K 3/K 4influenza la stabilità del potenziale e il tempo della sua costituzione. Si è riscontrato che entro 15 minuti il segnale analitico raggiunge il 99% del valore massimo, indipendentemente dalla natura dell'antiossidante e dalla sua concentrazione. La misurazione del potenziale dopo l'aggiunta di un antiossidante o di un'aliquota di un campione deve essere effettuata ad un tempo prestabilito (5 ± 1) minuti.

Utilizzando il metodo FRAP con rilevamento potenziometrico, è stata determinata l'attività antiossidante del vino rosso secco "Cabernet NR" e del tè nero "Krasnodarsky", che ammontava a (14,3 ± 0,4) e (8,3 ± 0,3) mmol/dm 3, rispettivamente.

È stata effettuata la certificazione metrologica del metodo per determinare il contenuto totale di antiossidanti nel tè nero e nel vino rosso secco. Sono stati ottenuti i seguenti indicatori di precisione: per il vino: Sr=7%; r=19%; R=23%; S R =1%; per il tè nero: Sr=4%; r=11%; R=13%; S.R. =3%

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Appendice A

Risultati per la valutazione della precisione del tè nero e del vino rosso secco

Tabella 1 – Risultati per la valutazione della precisione del tè nero

Tabella 2 - Risultati per la valutazione della precisione del vino rosso secco

№Х1Х2Хi18,6628,6258,64328,6078,3808,49338,4508,6258,52748,3798,7328,55558,6078,3108,45868,6968,4498,57278,5728,6608,61 688,43 48.3628.39798 , 4348,4328,432108,6788,5728,625

AGENZIA FEDERALE PER L'ISTRUZIONE ISTITUTO EDUCATIVO SUPERIORE

EDUCAZIONE PROFESSIONALE

ISTITUTO PEDAGOGICO STATALE SLAVICO-ON-KUBAN

Facoltà di Biologia e Chimica

Biologia specializzata

Dipartimento di Biologia Naturale

e discipline mediche

Lavoro finale di qualificazione.

Studio dell'attività antiossidante delle piante

Completato dal supervisore scientifico

Studente del 5° anno Professore Associato, Ph.D.

Olshanskaya Elena Petrovna Izbranova Svetlana Iosifovna

_______________ __________________

Firma Firma

Slavyansk - su - Kuban

introduzione

Capitolo 1. Attività antiossidante dei materiali vegetali

1.1 Antiossidanti di materiali vegetali

1.1.1 Caratteristiche generali degli antiossidanti vegetali

1.1.2 Acido ascorbico come antiossidante

1.2 Descrizione biologica delle piante ad attività antiossidante

1.2.1 Limone comune (Citrus limon)

1.2.2 Viburnum viburnum (Viburnuvopulus L.)

1.2.3 Rosa canina alla cannella (Rosa majalis)

1.3 Piante di tè (Thea)

Capitolo 2. Materiali e metodi di ricerca

2.1 Oggetti

2.2 Materiali di ricerca

2.3 Metodi di ricerca

Capitolo 3. Risultati della ricerca e loro discussione. Studio dell'attività antiossidante delle piante

3.1 Determinazione del contenuto di vitamina C nel viburno comune durante la maturazione

3.2 Determinazione dell'attività antiossidante dei materiali vegetali

3.3 Determinazione del contenuto di composti polifenolici in vari tipi di tè

3.4 Effetto dei componenti del tè sull'attività antiossidante

Parte metodologica. Lezione di biologia in terza media sull'argomento: "Vitamine"

Bibliografia

Applicazioni

introduzione

L'ossigeno è un potente agente ossidante; le reazioni di ossidazione che lo coinvolgono sono una fonte di energia per molti organismi viventi. D'altra parte, durante il metabolismo si formano composti di ossigeno che distruggono la struttura e le sostanze della cellula. Di conseguenza, il metabolismo nella cellula e in tutto il corpo viene interrotto. Il ruolo degli antiossidanti è quello di legare e rimuovere i radicali liberi dal corpo.

Il corpo ha un proprio sistema per combattere i radicali liberi in eccesso, ma è indebolito da fattori ambientali avversi. È noto che molte piante contengono sostanze ad attività antiossidante.

Molta attenzione è attualmente rivolta ai bioflavonoidi, un ampio gruppo di composti a struttura polifenolica. Ci sono informazioni sulla loro attività antiossidante. Gli antiossidanti di origine vegetale sono ampiamente utilizzati in medicina e nell'industria alimentare sotto forma di estratti e oli naturali.

Oggetto di studio sono i frutti del viburno, della rosa canina e del limone comune e varie varietà di tè.

Oggetto di studio è l'attività antiossidante dei materiali oggetto di studio.

Lo scopo del nostro lavoro era studiare l’attività antiossidante delle piante.

Per raggiungere l’obiettivo sono stati fissati i seguenti compiti:

1. Studiare le caratteristiche del viburno, del limone, della rosa canina, del tè e la loro attività antiossidante;

2. Determinare il contenuto di acido ascorbico nelle infusioni di frutti di viburno durante il periodo di maturazione;

3. Determinare il contenuto di acido ascorbico nei frutti di limone, cannella, rosa canina e vari tipi di tè;

4. Determinare il contenuto di composti polifenolici in vari tipi di tè;

5. Studia l'effetto dei componenti del tè sull'attività antiossidante.

L'ipotesi del lavoro è che se le piante studiate hanno attività antiossidante, allora la quantità di antiossidanti dipende dal tipo di pianta.

Significato teorico: come risultato del lavoro svolto, è stato determinato il contenuto di acido ascorbico nel viburno comune, nel limone comune, nella rosa canina alla cannella e in vari tipi di tè.

Significato pratico: è stato stabilito che i componenti del tè riducono l'attività antiossidante, quindi non è consigliabile bere il tè dopo i pasti.

Capitolo 1. Revisione della letteratura. Studio degli antiossidanti attività dei materiali vegetali

Gli antiossidanti sono sostanze che rallentano o impediscono l'ossidazione dei composti organici. Proteggono il corpo dagli effetti negativi dei radicali liberi. L'antiossidante si combina con il radicale libero e blocca l'effetto distruttivo dell'elettrone in più. Con l'aiuto di un sistema di difesa enzimatica, il corpo converte l'ossidante cellulare in acqua e ossigeno (non radicale).

1.1 Antiossidanti di materiali vegetali

Il corpo ha un proprio sistema per combattere i radicali liberi in eccesso, ma è indebolito dall’inquinamento, dal fumo, dalla luce solare diretta e ha bisogno di sostegno. È stato scoperto che molte piante contengono flavonoidi, un ampio gruppo di composti con struttura polifenolica che legano i radicali liberi, cioè i radicali liberi. sono antiossidanti.

1.1.1 Caratteristiche generali degli antiossidanti vegetali

I radicali liberi si formano costantemente nel corpo, quindi deve esserci una protezione antiossidante contro di loro, che è uno dei componenti più importanti del sistema immunitario nel suo complesso. È importante integrare la dieta con sostanze naturali - antiossidanti, che migliorano la protezione contro i radicali liberi, aumentando così l'immunità, la resistenza del corpo a fattori esterni avversi e rallentando il processo di invecchiamento.

Gli antiossidanti più importanti sono: vitamine C, E, β-carotene, selenio, bioflavonoidi (sostanze vitaminiche contenute nella buccia delle piante - arance, limoni, pomodori, ecc.). Molti estratti vegetali, vitamine, aminoacidi, minerali e oligoelementi hanno proprietà antiossidanti direttamente o indirettamente, poiché fanno parte degli enzimi antiossidanti.

Nelle piante sono stati trovati circa 5.000 flavonoidi, antiossidanti con una vasta gamma di effetti curativi. Hanno proprietà vasodilatatrici, antitumorali, antinfiammatorie, battericide, immunostimolanti e antiallergiche.

Gli antiossidanti presenti nelle piante sono i polifenoli. Molti integratori erboristici - ginseng siberiano (adattogeno), gingko biloba (stimolante mentale), cardo marino (protegge il fegato), curcuma longa (effetto antinfiammatorio) e mirtillo (vista, artrite reumatoide) - oltre alle loro proprietà principali, sono anche antiossidanti. Negli estratti di erbe, gli ingredienti bioattivi vengono liberati dalle pareti cellulari e per questo motivo vengono assorbiti più facilmente dall'organismo. Affinché l'integratore dia il massimo effetto, deve contenere una quantità rigorosamente standardizzata di sostanze bioattive: ginseng siberiano - 0,5% eleuteroside E, gingko biloba - 24% flavoglicosidi, cardo marino - 80% silimarina, curcuma lunga - almeno 80% curcuminoidi, mirtilli - 25% antocianidine. È necessario scegliere solo integratori a base di erbe che soddisfino esattamente tutti questi indicatori.

Caratteristiche degli antiossidanti.

Beta carotene. Precursore carotenoide della vitamina A. Lega l'ossigeno atomico e i radicali perossilici. Protegge la membrana cellulare vulnerabile (lipidica). Si trova nelle arance, nelle verdure gialle, nella zucca, nelle carote, nelle patate dolci e nelle verdure verde scuro come i broccoli.

Vitamina E (d-alfa tocoferolo). Principale antiossidante liposolubile. Protegge gli acidi grassi all'interno e intorno alle cellule dai radicali liberi e dall'ossidazione dei lipidi. Contenuto in olio vegetale preparato mediante spremitura a freddo; nel germe di grano, nel pane e nei cereali integrali.

Estratto di tè verde. Antiossidante polifenolico, ricco di catechine, lega radicali anionici, superossidi, acqua ossigenata. L'estratto deve contenere almeno il 50% di catechine e polifenoli. La dose raccomandata è di 300-700 mg al giorno.

Estratto di cardo marino. Il principale protettore del fegato. L'estratto deve contenere il 70% o più di silimarina. La dose raccomandata è di 300-600 mg al giorno.

Estratto di gingko biloba. Protegge le membrane cellulari dall'ossidazione dei lipidi, in particolare la guaina mielinica dei nervi e delle cellule cerebrali. L'estratto ottenuto dalle foglie dell'albero del Ginkgo biloba contiene il 24% di flavoglicosidi. La dose raccomandata è di 120 mg al giorno.

Estratto di semi d'uva. Un potente antiossidante contenente il 95% di procianuri (oligomeri di polifenoli), che hanno la proprietà di legare i radicali liberi e di inibire l'attività della coantine ossidasi, un enzima che include la produzione a catena dei radicali dell'ossigeno. Estratto dai semi dell'uva rossa. Dose raccomandata 50-100 mg al giorno.

Estratto di citronella cinese. Una pianta con una spiccata capacità di proteggere il fegato e ha proprietà antiossidanti. La dose raccomandata è di 200-300 mg al giorno.

Licopene. Un potente cartinoide che lega l'ossigeno atomico e i radicali perossilici. Protegge la membrana lipidica della cellula. Contenuto nei pomodori. La dose raccomandata è di 5-10 mg al giorno.

Acido alfa lipoidico. L’acido lipoico non è una vitamina, ma è essenziale per il funzionamento dell’organismo. Protegge le cellule e converte il glutatione ossidato nella sua forma più funzionale. La dose raccomandata è di 50-100 mg al giorno.

Selenio. Un importante antiossidante minerale e spazzino dei radicali liberi. Partecipa alla sintesi dell'enzima glutatione perossidasi. La dose raccomandata è di 200-400 mg al giorno (forma I-selenometionina).

Qualsiasi organismo può essere considerato un esempio del lavoro di un sistema antiossidante equilibrato e ben funzionante, costituito da molti componenti: si tratta di vitamine (vitamine C, E, P) ed enzimi (glutatione perossidasi, superossido dismutasi) e microelementi (selenio, zinco) e composti polifenolici (flavonoidi) e aminoacidi contenenti zolfo (cisteina, metionina), nonché il tripeptide glutatione. Questi sono solo alcuni dei composti che hanno effetti antiossidanti. La natura chimica di questi composti è varia, tra questi ci sono componenti sia idrosolubili che liposolubili. Il principio fondamentale su cui si basa l'azione del sistema antiossidante di un organismo vivente è il sinergismo. Sta nel fatto che i componenti del sistema lavorano insieme, ripristinandosi a vicenda e migliorando l'efficacia dell'azione.

La forza dei sistemi antiossidanti naturali sviluppati durante l’evoluzione è stata testata nel corso di molti milioni di anni. Pertanto, sembra abbastanza logico tenere conto dell'esperienza della natura e utilizzare nei cosmetici complessi antiossidanti naturali isolati, ad esempio, dalle piante. Ci sono diverse ragioni per questo:

1. Un'ampia selezione di piante che non hanno solo effetti antiossidanti, ma anche altre proprietà benefiche per la pelle. Pertanto, a partire da materiali vegetali si possono preparare preparati multifunzionali;

2. Quando si utilizzano piante, non vi è alcun rischio di infezione infettiva, come nel caso dell'utilizzo di materie prime animali;

3. Disponibilità di materie prime vegetali.

1.1.2 Acido ascorbico come antiossidante

Acido α-lattone 2,3-deidro-L-gulonico

La vitamina C è un potente antiossidante. Svolge un ruolo importante nella regolazione dei processi redox, partecipa alla sintesi del collagene e del procollagene, al metabolismo dell'acido folico e del ferro, nonché alla sintesi degli ormoni steroidei e delle catecolamine. L'acido ascorbico regola anche la coagulazione del sangue, normalizza la permeabilità capillare, è necessario per l'emopoiesi e ha effetti antinfiammatori e antiallergici.

La vitamina C è un fattore che protegge il corpo dagli effetti dello stress. Rafforza i processi riparativi, aumenta la resistenza alle infezioni. Riduce gli effetti di vari allergeni. Esistono molti prerequisiti teorici e sperimentali per l’uso della vitamina C nella prevenzione del cancro. È noto che i malati di cancro, a causa dell'esaurimento delle sue riserve nei tessuti, spesso sviluppano sintomi di carenza vitaminica, che richiedono la loro somministrazione aggiuntiva.

La vitamina C migliora la capacità del corpo di assorbire calcio e ferro e di rimuovere rame, piombo e mercurio tossici.

È importante che in presenza di una quantità adeguata di vitamina C, la stabilità delle vitamine B1, B2, A, E, degli acidi pantotenico e folico aumenti significativamente. La vitamina C protegge il colesterolo lipoproteico a bassa densità dall'ossidazione e, di conseguenza, le pareti dei vasi sanguigni dalla deposizione di forme ossidate di colesterolo.

La capacità di affrontare con successo lo stress emotivo e fisico dipende più dalla vitamina C che da qualsiasi altra vitamina. Le ghiandole surrenali, che secernono gli ormoni necessari per affrontare situazioni stressanti, contengono più ascorbato di qualsiasi altra parte del corpo. La vitamina C aiuta a produrre questi ormoni dello stress e protegge il corpo dalle tossine prodotte durante il loro metabolismo.

Il corpo umano non può immagazzinare la vitamina C, quindi è necessario riceverla costantemente in aggiunta. Poiché è solubile in acqua e sensibile al calore, il cibo cotto lo distrugge.

Fonti vegetali: agrumi, verdure a foglia verde, melone, broccoli, cavolini di Bruxelles, cavolfiori e cavoli, ribes nero, peperoni, fragole, pomodori, mele, albicocche, pesche, cachi, olivello spinoso, rosa canina, sorbo, patate al forno ".

Erbe ricche di vitamina C: erba medica, verbasco, radice di bardana, cerastio, eufrasia, semi di finocchio, fieno greco, luppolo, equiseto, alghe, menta piperita, ortica, avena, pepe di cayenna, peperoncino, prezzemolo, aghi di pino, achillea, piantaggine, lampone foglia, trifoglio rosso, rosa canina, zucchetto, foglie di viola, acetosa.

Una completa e prolungata assenza di vitamina C nella dieta o la cessazione del suo assorbimento a causa di una malattia porta ad una malattia nota come scorbuto. L'insorgenza della vitamina C è facilitata dalla malnutrizione energetica e proteica, dalle dure condizioni climatiche e dal lavoro estenuante e massacrante. Le forme iniziali di carenza di vitamina C sono abbastanza comuni. Più spesso e in misura maggiore, con ipovitaminosi ascorbica, si notano affaticamento, diminuzione della resistenza al freddo e maggiore suscettibilità alle malattie del tratto respiratorio superiore. Il sanguinamento delle gengive viene rilevato quando si lavano i denti. Sulla pelle della parte inferiore delle gambe, delle cosce e della schiena si verificano piccole emorragie attorno ai follicoli piliferi, si nota la loro elevazione, che viene percepita come pelle d'oca durante un brivido. Lo stato di carenza di vitamina C può manifestarsi in forma latente per lungo tempo, creando un contesto favorevole per la formazione di aterosclerosi, stato astenico, nevrosi e reazioni allo stress. Esistono osservazioni che indicano che una forma latente di carenza di vitamina C è un fattore predisponente alla formazione di eccesso di peso corporeo. Le malattie che insorgono in questo stato sono più gravi, durano più a lungo e le complicanze si verificano più spesso.

Le fonti più importanti di vitamina C sono elencate nell'Appendice 1.

Gli scienziati affermano che è noto da tempo che la vitamina C è molto importante per le piante: agisce come un antiossidante che aiuta le piante a resistere alla siccità, all'ozono e alle radiazioni ultraviolette attive. Tuttavia, fino ad ora non si sapeva che la vitamina C stimola anche la crescita delle colture vegetali.

Quando verdure, frutta e bacche vengono conservate per lungo tempo, il loro valore vitaminico diminuisce. La conservazione della vitamina C dipende anche dal metodo di lavorazione culinaria degli alimenti.

Il fabbisogno giornaliero di acido ascorbico di una persona adulta sana varia da 70 a 100 mg.

1.2 Descrizione biologica delle piante ad attività antiossidante

1.2.1 Limone comune (Citrus limon)

Albero sempreverde della famiglia delle Rutacee, alto fino a 5 m, con chioma espansa, piramidale. Le foglie sono di colore verde scuro, di forma ovale, lunghe 7-15 cm, sono dense e coriacee, con piccioli corti. Se esposto alla luce, puoi vedere punti luminosi: ghiandole che secernono oli essenziali. Se strofini leggermente la superficie delle foglie, puoi sentire un leggero profumo di agrumi. Il limone è una pianta coltivata ben nota che viene coltivata da diversi millenni. La sua origine è sconosciuta; alcuni scienziati ritengono che la sua patria sia l'India nordoccidentale. Intorno agli inizi del III secolo d.C. Il limone iniziò a essere coltivato nell'Italia meridionale, nell'VIII secolo - in Egitto e Iraq, e alla fine del primo millennio - in Cina. All'inizio del secondo millennio gli arabi lo avevano diffuso in tutta la regione del Mediterraneo. Cristoforo Colombo portò i semi di questa pianta nel Nuovo Mondo durante una delle sue spedizioni. Ora i limoni vengono coltivati in molti paesi del mondo. In Russia vengono coltivati nelle regioni subtropicali della costa del Mar Nero. I rami sono ricurvi, le foglie sono lucide, di forma ovale, i fiori sono molto profumati, bianchi o rosa. Fiori bianchi del diametro di 2-3 cm compaiono alle ascelle delle foglie o all'estremità dei rami, solitari o raccolti in infiorescenze. I petali, e ce ne sono 4 o 5, di solito si arricciano leggermente all'indietro. L'odore dei fiori è simile al gelsomino e hanno una tonalità specifica, in alcuni esemplari aggressiva. Ogni fiore dura diversi giorni. I petali caduti continuano a puzzare, quindi possono essere raccolti e utilizzati per profumare. I frutti, che in alcune cultivar raggiungono i 10 cm di diametro, sono di colore verdastro o giallastro. La buccia può essere sottile o spessa (fino a 10 mm), dotata di ghiandole che secernono oli essenziali.

Gli allevatori hanno sviluppato molte cultivar e ottenuto ibridi con specie affini. Differiscono per dimensioni e forma, colore della buccia e della polpa, equilibrio del gusto agrodolce, numero di semi o mancanza di semi, mantenendo la qualità e alcune altre proprietà.

Il limone comune viene coltivato in Georgia, nel Caucaso settentrionale, in Moldavia e in Asia centrale. Ampiamente coltivata come pianta d'appartamento. Sconosciuto in natura.

Utilizzato nell'industria alimentare e dolciaria. Il succo della polpa di limone rimuove le macchie dai vestiti e da altre cose; viene utilizzato per pulire coltelli, cucchiai e forchette di metallo. Dai frutti vengono preparati succhi e bibite analcoliche e utilizzati come condimento per piatti dietetici. Nella pratica cosmetica, viene utilizzato per rimuovere le lentiggini e le macchie dell'età e in profumeria per aromatizzare lozioni e unguenti.

La frutta fresca serve come materia prima medicinale.

L'olio essenziale si ottiene dai frutti del limone, che contiene limonene (90%), alfa-pinene, gamma-terpinene, phallander, metileptenone, nonché ottil, caprilico e nonil aldeidi. Il succo di limone contiene acido citrico, zuccheri, vitamine C, A, B e D. Nella polpa del frutto si trovano sostanze pectiche, sali di potassio, rame e altri oligoelementi. La buccia contiene vitamina P, glicosidi flavonici, cumarine e sitosterolo.

1.2.2 Viburno comune ( Viburnuv opulus l .)

Il nome generico della pianta è viburno - da “viere” - torcere, intrecciare; "Opulus" è l'antico nome latino di un tipo di acero, per la sua somiglianza con le sue foglie.

Un arbusto ramificato o piccolo albero della famiglia dei caprifogli, alto 1,5-4 m, con corteccia rugosa grigio-brunastra punteggiata di verruche brune e giovani germogli nudi. Le foglie sono opposte, lunghe e larghe 5-10 cm, picciolate, largamente ovate o arrotondate, trilobate e pentalobate, quasi glabre superiormente, lanuginose inferiormente, verdi in estate, porpora, rosse in autunno. I fiori sono bianchi o bianco-rosa, profumati, raccolti in infiorescenze corimbose - pannocchie. Le pannocchie sono larghe 5-10 cm, piatte, situate alla sommità dei rami fogliari. I fiori marginali dell'infiorescenza sono sterili, su steli sottili, lunghi 1-2 cm, bianchi, piatti, larghi 1,3-2,5 cm, corolla spicata con 5 lobi disuguali serve ad attirare gli insetti; i restanti fiori mediani sono bisessuali, sessili o quasi sessili, di colore bianco o bianco-rosato, campanulati, piccoli (fino a 0,5 cm di diametro), con lobi larghi smussati. Ci sono 5 stami, sono 1,5 volte più lunghi della corolla.

I frutti sono rossi, sferici, con all'interno un seme piatto del diametro di 0,8-1,2 cm, su un grappolo ci sono 80-100 frutti. Fiorisce in maggio-giugno. Matura in agosto-settembre. Il viburno fruttifica nel 3-4° anno. Dopo la maturazione, i frutti del viburno hanno un sapore agrodolce, motivo per cui esiste un detto: "Il viburno non dovrebbe essere un lampone". Ma dopo il primo gelo (o dopo la cottura), l'amarezza scompare e il viburno diventa “lampone”, da qui “lampone Kalinka”. Tuttavia, in termini di utilità, il viburno è superiore ai lamponi: nei suoi frutti c'è 1,5 volte più ferro, 2 volte più vitamina C e persino 3 volte più zuccheri.

Esistono circa 125 specie di viburno nel mondo, 10 crescono in Russia, di cui il più comune è il viburno comune. È diffuso nella parte europea della Russia, soprattutto nella zona centrale, nelle zone forestali e steppiche, negli Urali e in Siberia. Si trova anche nelle regioni forestali montane del Caucaso, della Crimea e del Kazakistan orientale. Penetra nelle regioni steppiche solo attraverso le valli fluviali. Cresce sparsamente nelle foreste umide, principalmente sui bordi, nelle radure, tra i boschetti di cespugli, nelle radure e lungo le rive dei bacini artificiali. Più abbondante nelle valli fluviali. Coltivato in giardini e parchi come arbusto ornamentale.

La corteccia di viburno contiene glicoside di viburnina, tannini del gruppo pirocatechina (circa il 2%), nonché fino al 6,5% di resina, la cui parte saponificata comprende acidi organici: formico, acetico, isovalerico, caprico, caprilico, butirrico, linoleico, cerotinico , palmitico, insaponificabile - fitosterolo, fitosterolo, saponine triterpeniche (circa 6%). Contiene glicosidi iridoidi (opulusiridoide, acetilopulusiridoide), acidi clorogenico, neoclorogenico, caffeico, ursolico e oleanolico, sali degli acidi valerico e caprilico, vitamine, zuccheri.

I frutti contengono fino al 32% di zucchero invertito, tannini (fino al 3%), pectina, olio essenziale, fitosteroli, aminoacidi, tannini (3%), provitamina A, vitamine P, K, acido isovalerico, acetico e ascorbico. Inoltre, sono presenti sostanze pectiniche e acidi organici. I semi contengono fino al 21% di olio grasso. Il viburno produce molti fitoncidi che uccidono gli agenti patogeni.

I frutti di viburno migliorano il lavoro del cuore, hanno un effetto astringente, antisettico, emostatico, coleretico, diuretico, abbassano la pressione sanguigna, accelerano la guarigione di ferite e ulcere e fermano il sanguinamento nelle ulcere peptiche dello stomaco e del duodeno.

La corteccia di viburno migliora le funzioni dello stomaco e dell'intestino, abbassa la pressione sanguigna, ha effetti antispastici, sedativi, emostatici, antinfiammatori, antisettici, tonifica e aumenta la capacità lavorativa. La corteccia di viburno migliora anche il tono dei muscoli uterini e ha un effetto vasocostrittore associato al glicoside viburnina presente nella corteccia della pianta.

1.2.3 Rosa canina alla cannella ( Rosa Majalis )

Da fine maggio a luglio, ai margini della foresta tra i cespugli e lungo le pianure alluvionali del fiume, fioriscono i cinorrodi, attirandoci con grandi fiori profumati. Già il nome della pianta suggerisce che sia ricoperta di spine. Ci sono soprattutto molte spine sui rami giovani, che così si proteggono dall'essere mangiate dagli erbivori. Ci sono meno spine sugli steli legnosi della rosa canina, poiché è abbastanza ben protetta dalla corteccia.

La rosa canina fu la prima pianta che, nei tempi antichi, le persone iniziarono a coltivare per la sua bellezza, e nel corso dei secoli da essa furono coltivati un gran numero di tipi di rose.

In Russia crescono oltre 60 specie di rosa canina. La rosa canina è un bellissimo arbusto spinoso. Per le preparazioni, due tipologie sono di grande importanza: la rosa canina e la rosa canina alla cannella.

La rosa canina spinosa ha rami brunastri, fittamente piantumati con setole sottili, diritte, uniformi. Fiorisce in giugno-luglio con fiori rosa. I frutti sono ovoidali, lisci, lucenti. La rosa ad ago cresce nella zona forestale, entra nella tundra dall'Oceano Pacifico a Leningrado, ma a ovest, dal Lago Onega, si dirada.

I cinorrodi alla cannella, a differenza dei cinorrodi, crescono nelle pianure alluvionali, tra gli arbusti e nelle foreste. I rami sono lucidi, rosso-marroni. Gli steli fioriferi sono dotati di spine ricurve verso il basso, situate a coppie alla base del picciolo, e i germogli fogliari, inoltre, sono seduti con sottili spine diritte di lunghezza disuguale. I cinorrodi alla cannella crescono in quasi tutto il territorio europeo della Russia, soprattutto nel nord.

Un cespuglio spinoso senza pretese: una rosa selvatica.

C'è più vitamina C nella rosa canina che nel ribes e nel limone. Sono presenti vitamine B, K, P, carotene, zuccheri, tannini, acidi organici, pectine, microelementi. I semi contengono vitamina E. I preparati dei frutti di questo concentrato multivitaminico naturale sono utilizzati per la prevenzione e il trattamento dello scorbuto, della cecità notturna e di altre carenze vitaminiche, anemia, clorosi, aterosclerosi, ipertensione, vari sanguinamenti e altre malattie. Raccogli i cinorrodi prima del gelo.

Le radici contengono molti tannini, quindi vengono utilizzate come astringente.

Dai semi di rosa canina si ottiene un olio contenente acidi grassi e vitamine. Ha proprietà antinfiammatorie e cicatrizzanti.

1.2.4 Biologia della foglia di tè (Thea)

La maggior parte dei consumatori è abituata a distinguere i tè principalmente in base alla regione in cui vengono coltivati: cinese, indiano, Ceylon, georgiano, Krasnodar, ecc.

L'intera varietà di tè si divide in tre tipologie principali: nero, verde, oolong (tè rossi e gialli). Il colore è solo un riflesso esterno delle differenze nei processi biochimici di lavorazione delle foglie di tè, che in definitiva influenza la composizione chimica e le caratteristiche fondamentali del gusto e dell'aroma di ciascun tipo di tè.

I tè rossi e gialli sono tipologie intermedie tra il nero e il verde. I tè rossi sono più vicini al nero, mentre i tè gialli sono più vicini al verde.

Il nome biologico del tè all'ibisco è Hibiscus sabdarifa. L'Hibiscus sabdarifa appartiene alla famiglia delle malvacee (Malvaceae).

Nel mondo esistono più di 150 specie di ibisco. L'Hibiscus sabdarifa è un arbusto annuale, alto fino a 3,5 m, una pianta ramificata con un apparato radicale profondamente incastrato nel terreno.

Il fusto e le foglie sono verdi, con sfumature rossastre. Le foglie della parte superiore del cespuglio sono lisce, palmate, divise in 3-7 lobi con bordi frastagliati; nella parte inferiore della pianta la forma delle foglie è ovale. I fiori sono molto grandi, (5-7) cm di diametro, con pedicello corto e petali spessi. Sono di colore rosso vivo con una corolla viola scuro all'esterno e viola scuro all'interno. Alla base dei petali c'è una macchia gialla, a volte marrone. I calici dei fiori di ibisco (la parte che viene essiccata e utilizzata come tè) sono rossastri, talvolta verdastri. Al termine della fioritura, il calice acquisisce una tonalità rosso chiaro, aumenta di dimensioni, diventa carnoso e succoso.

Il mate è una bevanda simile al tè ottenuta dalle foglie essiccate dell'albero tropicale sempreverde Illex Paraguariensis. È un albero arbustivo ramificato che in natura vive fino a 50 anni e raggiunge un'altezza fino a 15 metri.

La quota di proteine e amminoacidi nel tè è del 16-25%, la quota di zuccheri e carboidrati è del 10-16%.

Ci sono più proteine nelle foglie di tè che in qualsiasi altra cosa, perché... È da questi che consiste principalmente la fibra della foglia di tè. Inoltre, il tè contiene molti diversi composti contenenti proteine, come gli enzimi.

Le principali proteine solubili nel tè sono l'albumina, di cui è presente fino al 10% nel tè verde (meno nel tè nero).

In situazioni estreme, il tè è un alimento dietetico complesso che compensa completamente la mancanza di proteine e vitamine nel corpo.

Il tè contiene inoltre più di 17 aminoacidi, alcuni dei quali si trovano allo stato libero. Gli aminoacidi contribuiscono in modo significativo alla creazione dell'aroma caratteristico del tè.

Fino al 12% dei polisaccaridi contenuti nel tè (amido, cellulosa, emicellulosa, ecc.) sono insolubili e quindi inutili. Inoltre, maggiore è la quantità di zuccheri e carboidrati nel tè, peggiore è la sua qualità.
1) Zuccheri (come fruttosio, glucosio, maltosio) - 0,73-1,41%.
2) Amido - 0,82 - 2,96%.

3) Pectine - 6,1%.

Le pectine favoriscono la guarigione delle ferite, riducono il colesterolo nel sangue, migliorano il metabolismo degli acidi biliari e neutralizzano la tossicità e gli effetti collaterali degli antibiotici. Le pectine hanno un effetto benefico sulle mucose del rinofaringe, della gola, dell'esofago, dello stomaco, ecc., Avvolgendole con una sorta di strato protettivo.

Ad esempio, è più difficile scottarsi con il tè caldo che con l'acqua bollente, perché... Sono le pectine che proteggono le mucose dalle ustioni. Questa proprietà, unita alle proprietà tanniche dei tannini, rende il tè un ottimo agente antiscottatura e antinfiammatorio.

Le sostanze minerali nel tè sono il 4-7%. Ma in generale possiamo distinguere macro e microelementi.

Macroelementi del tè, mg/g: potassio – 17,90, calcio – 4,70, magnesio – 2,20, ferro – 0,20.

A proposito di macronutrienti. Da un lato, una normale concentrazione di potassio nel sangue è un prerequisito per il funzionamento del muscolo cardiaco; d'altra parte, nelle cellule nervose esiste un equilibrio potassio-sodio, senza il quale il suo normale funzionamento è impossibile.

Tabella 1

Microelementi del tè, mcg/g

Esistono anche prove di un elevato contenuto di fosforo nel tè, circa lo 0,3% del peso secco. Il fosforo è una sostanza essenziale per l'attivazione delle funzioni cerebrali. Esistono anche prove di un contenuto di fluoro molto significativo nel tè - circa lo 0,2% del peso secco.

Inoltre, il tè si accumula prevalentemente ed è un prezioso vettore dei seguenti elementi: alluminio, manganese, boro, bario, zinco, rame, nichel. Il corpo assorbe molto bene manganese, zinco, rame e nichel dal tè.

La quota di pigmenti nella composizione chimica del tè è dell'1-12%. I pigmenti sono coloranti. Nell'infuso del tè si possono vedere colori e sfumature giallo-verde-rosso-viola - bruno-marrone, determinati da alcuni pigmenti. Inoltre, i primi due sono più rilevanti per i tè non fermentati, mentre i secondi due sono più rilevanti per i tè oolong e neri.

1) Clorofilla. Questo pigmento conferisce il colore verde alle foglie di tè vive e in crescita. Durante il trattamento termico viene in gran parte distrutto e rimane in misura maggiore solo nei tè non fermentati (bianchi, verdi, ecc.)

2) Carotene e xantofilla. Si scuriscono durante il trattamento termico e contribuiscono in parte a conferire al tè un colore bruno-rossastro. Anche se non ce ne sono molti nel tè.

3) Teoflavina. Nel tè ce n'è circa l'1-2%. Conferisce all'infuso di tè una tonalità giallo dorato. Un alto contenuto di teoflavina è caratteristico dei tè varietali di alta qualità. Se non ce n'è abbastanza, il tè risulta opaco, sbiadito e dà l'impressione di essere leggermente torbido.

4) Tearubigina. Nel tè 10-20%. Conferisce all'infuso di tè una tonalità rosso-marrone. Nell'agrotipo indiano del tè, la tearubigina è più scura (marrone, marrone), in quello cinese è più chiara (rossa).

La teoflavina e la tearubigina derivano dai polifenoli del tè. Entrambi i pigmenti si formano durante il processo di fermentazione. Le loro strutture chimiche sono molto simili, ma la teoflavina è chimicamente più attiva (e quindi si decompone più facilmente) e si converte facilmente in thearubigina.

Nel buon tè nero, il rapporto tra teaflavina e tearubigina dovrebbe essere 1/10.

Il componente più importante delle foglie di tè e del tè finito è un complesso di tannini, o il cosiddetto tannino del tè, che determina non solo le proprietà organolettiche, ma anche il valore biologico del prodotto. La teotanina è una sostanza bianca dal sapore astringente, solubile in acqua e che conferisce alla bevanda una specifica astringenza e forza, isolata dal chimico olandese Deuss. È accertato che i principali accumulatori di tannino sono i germogli di due-tre anni e più precisamente la gemma e la prima foglia, dove si accumula fino al 30%. In una foglia grossolana, le riserve di tannini sono nettamente ridotte. Maggiore è la qualità delle materie prime, maggiore è la quantità di tannino nel prodotto finito, fino al 18%. I tannini giallo limone, ossidandosi durante la fermentazione, conferiscono all'infuso un caratteristico colore dorato scuro e completano l'aroma.

Il tannino è un composto fenolico polimerico. Insieme ai polifenoli, la pianta contiene anche vari composti fenolici monomerici. Tra questi figurano un gruppo di acidi ossidanti (acidi gallico, salicilico e protocatechinico), derivati dell'acido cinnamico e lattoni (cumarine, teogalina, acido caffeico, clorogenico e cumarico). Anche le sostanze coloranti - gli antociani con la loro tavolozza rosso-viola - partecipano alla creazione del gusto del tè lungo.

La questione della formazione, trasformazione e condizioni per l'accumulo dei composti fenolici è centrale per la biochimica e la fisiologia del tè. Il componente principale del complesso complesso tannico sono le catechine. Queste sostanze cristalline incolori furono identificate per la prima volta negli anni '30 del secolo scorso da F. Rouget. Facilmente solubili in acqua calda, si ossidano facilmente, perdendo così il loro sapore amaro e acquisendo una tinta bruno-rossastra. Il loro estratto viene utilizzato non solo per la concia delle pelli, ma anche per tingere i tessuti di cotone, aromatizzare cacao, caffè, tè, vino, birra e tabacco. Oggi si sa che più di duecento specie di piante sono portatrici di catechina, che funziona come trasmettitori di idrogeno durante la respirazione.

Essendo parte integrante dei tannini, le catechine superano ampiamente le proprietà per le quali i tannini sono famosi. Come i tannini, le catechine hanno proprietà antimicrobiche. Un decotto di tè verde cura con successo i pazienti affetti da dissenteria. Le catechine del tè possono aumentare la deposizione di vitamina C, ritardarne l’eliminazione dal corpo e proteggere dallo scorbuto.

La percentuale di polifenoli nel tè varia dal 9 al 35%.I composti fenolici sono una delle classi più comuni e numerose di composti naturali con attività biologica. L'attività è fornita dalla presenza di idrossile fenolico libero o legato. I composti fenolici sono divisi in tre gruppi:

1) Fenoli semplici (fenili, alcoli fenolici, acidi fenolici, cumarine, ecc.) con un anello aromatico;

2) Fenoli a due anelli aromatici (flavonoidi, flavoni, isoflavonoidi, ecc.);

3) Fenoli polimerici (polifenoli).

Epicatechina. Uno dei polifenoli del tè. Peso molecolare - 290.

Più attivi sono i composti fenolici del primo e del secondo gruppo, che hanno un ampio spettro di effetti farmacologici (antimicrobico, adattogeno e stimolante, diuretico, vitamina P, emostatico, ipotensivo, antitumorale), e che si trovano anche in piccole quantità in tè. Sfortunatamente, molti composti fenolici dei gruppi 1 e 2, ampiamente presenti nella foglia di tè in crescita, vengono in gran parte persi durante la produzione del tè, lasciando prevalentemente polifenoli. Va notato che i tè bianchi e verdi sono i più ricchi di composti fenolici attivi.

Il tè contiene più di 30 polifenoli, tradizionalmente chiamati tannini o tannini. Il fatto è che i polifenoli sono in grado di formare composti chimici molto stabili con le proteine, il che porta ad un “effetto abbronzante”. Questo effetto ha buone applicazioni farmaceutiche: i polifenoli del tè agiscono come agenti emostatici, cicatrizzanti, astringenti, antinfiammatori e battericidi.

I polifenoli idrosolubili predominanti nel tè sono: gallocatechina gallato, l-epicatechina gallato, l-epigallocatechina, dl-gallocatechina, l-gallocatechina gallato, l-epicatechina, acido gallico libero. Alcuni tannini sono legati a proteine e alcaloidi.

Alcuni polifenoli hanno le proprietà della vitamina P: migliorano la digestione, rafforzano i vasi sanguigni e i piccoli capillari e riducono la permeabilità delle loro pareti. Se combinato con la caffeina, il tè è considerato uno stimolante cerebrale unico. Va anche notato che l'insieme completo di catetine è tipico solo per il tè verde, ce ne sono pochissimi nel tè nero.

Quando si prepara il tè, è necessario tenere conto del fatto che i tannini reagiscono attivamente con il ferro. Quando si prepara il tè in un contenitore di ferro (o si utilizza acqua ricca di ferro), il risultato sono foglie di tè marrone torbido (“arrugginite”). Un ambiente acido, al contrario, alleggerisce le foglie di tè (tutti conoscono l'effetto del limone sul tè).

I polifenoli si dissolvono bene solo in acqua calda. Ecco perché il tè viene preparato con acqua bollente. Dopo che la birra si è raffreddata, spesso diventa torbida: anche questa è una proprietà dei polifenoli. Se la birra non diventa torbida durante il raffreddamento, ciò indica che il contenuto di polifenoli nella materia prima è chiaramente insufficiente. Se riscaldi il tè torbido a fuoco basso, diventerà di nuovo trasparente.

Più tannini sono presenti nel tè, più il suo gusto è aspro e astringente.

I polifenoli del tè vengono ora attivamente studiati perché... Tra questi, molti non sono ancora stati studiati; è allo studio anche la sintesi chimica di nuovi composti fenolici durante la fermentazione.

Capitolo 2. Materiali e metodi di ricerca

2.1 Oggetti

Oggetto di studio sono i frutti del viburno, della rosa canina e del limone comune e varie varietà di tè. Oggetto di studio è l'attività antiossidante dei materiali oggetto di studio.

Nel periodo dal 12 settembre 2007 al 31 ottobre 2007, 3 volte a settimana sono state selezionate 10-15 bacche dal viburno comune nella città di Slavyansk-on-Kuban, villaggio di Kubris. Le bacche sono state raccolte insieme al raspo, per non danneggiarne la tenuta, in più pezzi da spazzole diverse per una maggiore affidabilità dell'esperimento.

Per studiare il contenuto di tannini nel tè, sono state scelte le seguenti varietà: mate verde, tè rosso Rooibos, tè bianco “Heavenly Wind”, tè verde “Azure Placer” e tè nero “Lisma”.

2.2 Materiali di ricerca

Reagenti e attrezzature: bottiglie, essiccatore, mortaio e pestello, cotone idrofilo, imbuto di vetro, unità di titolazione, acqua distillata, soluzione di amido allo 0,5%, soluzione di iodio 0,003 N.

Preparazione delle soluzioni

1. Soluzione di amido allo 0,5%. Aggiungere 0,5 g di amido in polvere a 30 ml di acqua distillata, mescolare accuratamente e scaldare a ebollizione. Alla soluzione risultante sono stati aggiunti 70 ml di acqua distillata fredda e raffreddata.

2. Soluzione di iodio 0,003 n. 3 ml di soluzione di iodio 0,1 N sono stati aggiunti a 97 ml di acqua distillata.

3. Preparazione di un campione di tè per l'analisi per determinare il contenuto di tannini.

In un pallone della capacità di 250 cm 3 si mettono 2,5 g di un campione di tè premacinato, prelevato da un campione medio, con un errore di pesatura non superiore a 0,0002 g, si aggiungono 200 cm 3 di acqua distillata bollente e posto a bagnomaria. L'estrazione viene effettuata per 45 minuti. L'estratto viene filtrato sotto vuoto tramite imbuto Buchner in un pallone da 500 cm 3, il filtrato viene trasferito in un matraccio tarato da 250 cm 3, raffreddato e portato a tacca con acqua distillata.

2.3 Metodi di ricerca

Determinazione dell'umidità dei frutti

Pestate 2 g di frutta in un mortaio. Posizionare la massa risultante in una bottiglia, la cui massa deve essere determinata in anticipo. Mettere la bottiglia in un essiccatore ad una temperatura di 70ºC per un giorno. Trascorso il tempo, misurare il peso della bottiglia da pesare. Calcolare la sostanza secca assoluta utilizzando la formula:

M.s.v.= m1-m2,

Dove: M.s.v- - massa di sostanza assolutamente secca;

m1 – massa di una bottiglia vuota;

m2 – massa della bottiglia con frutta dopo l'essiccazione.

Calcola l'umidità utilizzando la formula:

W= ((a 1 - a 2)\ a1) 100%,

W-umidità,%;

a 1 è la massa del campione prima dell'essiccazione, g;

a 2 è la massa del campione dopo l'essiccazione, g.

Determinazione della vitamina C nei materiali di prova

Macinare 2 g di frutta in un mortaio. Trasferire la massa risultante in un bicchiere e aggiungere 10 ml di soluzione di HCl al 2%. Mescolare accuratamente e filtrare con un imbuto di vetro con un batuffolo di cotone in una beuta da 50-100 ml. Sciacquare la miscela sul filtro con qualche goccia d'acqua. Aggiungere 1 ml di soluzione di amido allo 0,5% al filtrato e titolare con una soluzione di lavoro di iodio 0,003 N fino alla comparsa di una colorazione blu.

Quando si calcola il contenuto di vitamina C in un prodotto, utilizzare la formula per la determinazione della massa:

M= ((n E)\1000) V,

Dove: n è la concentrazione molare di iodio equivalente;

Concentrazione E-molare di vitamina C equivalente pari a 88 g;

V è il volume di iodio utilizzato per la titolazione, ml.

Per quantificare in modo più accurato la vitamina C, condurre esperimenti paralleli.

Determinazione del contenuto di tannini nel tè

La determinazione è stata effettuata secondo GOST 19885-74.

Il metodo si basa sull'ossidazione del tannino del tè con permanganato di potassio in presenza di carminio indaco come indicatore.

Utilizzando una pipetta si prelevano 10 cm 3 di estratto e si pongono in una bacinella di evaporazione, si aggiungono 750 cm 3 di acqua di rubinetto, 25 cm 3 di soluzione di indaco carminio e si titola con una soluzione 0,1 mol/dm 3 di permanganato di potassio sotto costante agitazione con una bacchetta di vetro. Il colore blu cambia gradualmente passando dal blu-verde, al verde scuro e chiaro, dal giallo-verde al giallo dorato.

La fine della reazione è determinata dalla scomparsa della tinta verde e dalla comparsa di un colore giallo puro. Calcolare quindi la quantità di soluzione 0,1 mol/dm 3 di permanganato di potassio per cm 3 consumata per l'ossidazione del tannino.

La quantità di permanganato di potassio utilizzata per titolare una soluzione di acqua e carminio indaco viene determinata in modo simile.

La quantità di tannino (A 1) in percentuale è determinata dalla formula:

dove a è la quantità di soluzione 0,1 mol/dm 3 di permanganato di potassio consumata per l'ossidazione del tannino, cm 3;

a 1 – la quantità di soluzione 0,1 mol/dm 3 di permanganato di potassio, consumata per titolare una soluzione di acqua e carminio indaco, cm 3;

0,004157 – quantità di tannino ossidato da 1 cm 3 0,1 mol/dm 3 soluzione di permanganato di potassio, g;

υ – quantità di estratto di tè ottenuto, cm 3;

υ 1 – quantità di estratto di tè prelevata per il test, cm 3;

m – massa di un campione di tè assolutamente secco, g;

Come risultato dell'analisi viene presa la media aritmetica di due determinazioni parallele, la cui discrepanza non deve superare lo 0,5% per p = 0,95.

Se il risultato dell'analisi si avvicina alla norma del contenuto di tannini per il tipo di tè corrispondente, sono necessarie due ulteriori determinazioni. In questo caso, come risultato dell'analisi viene presa la media aritmetica di due determinazioni parallele, la cui discrepanza non deve superare lo 0,7% per p = 0,95.

Determinazione dell'influenza dei componenti del tè sull'attività antiossidante

La quantità di vitamina C nel limone normale viene determinata secondo il metodo.

Aggiungi 2 ml di succo di limone all'estratto di tè di ciascuna varietà e determina il contenuto di vitamina C. Dopo 1 ora, trova il contenuto di acido ascorbico in ciascuna varietà. Il contenuto di vitamina C viene confrontato prima e dopo il tempo di esposizione.

Capitolo 3. Risultati della ricerca e loro discussione. Studio dell'attività antiossidante delle piante

3.1 Determinazione del contenuto di vitamina C nel viburno comune durante la maturazione

Il contenuto di umidità di tutti i campioni selezionati è stato determinato nella massa frantumata dei frutti di viburno. Il contenuto di umidità dei frutti di viburno durante la maturazione nel periodo dal 12 settembre al 31 ottobre varia dal 60% al 78,5%. La massima umidità nei frutti di viburno si osserva durante il periodo di maturazione dal 12 ottobre al 19 ottobre.

Figura 1. Umidità dei frutti di viburno durante la maturazione

È noto che il viburno ha un alto contenuto di vitamina C. I frutti del viburno sono ampiamente utilizzati come fonte di questa vitamina.

Dal 12 marzo 2007 al 31 ottobre 2007, i frutti del viburno comune che cresce nel villaggio di Kubris, nella regione di Slavyansk, sono stati selezionati ad intervalli di 3 giorni.

Utilizzando il metodo di titolazione dello iodio, il contenuto di vitamina C in ciascun campione è stato determinato secondo il metodo.

L'analisi dei risultati ha mostrato che il contenuto di vitamina C cambia durante il periodo di maturazione e dipende dal periodo di maturazione dei frutti di viburno. Nel periodo dal 12 settembre al 12 ottobre il contenuto di acido ascorbico passa da 1,44 g a 2,78 g per 100 g di sostanza secca. Nel periodo dal 12 ottobre al 19 ottobre è stata osservata la massima intensità di accumulo di vitamina C, pari a 3,1 g di acido per 100 g di sostanza secca. Nel periodo dal 19 ottobre al 31 ottobre il contenuto scende a 2,37 g per 100 g di sostanza secca.

Dopo aver tracciato la dinamica dei cambiamenti nella vitamina C, possiamo concludere che il momento ottimale per la raccolta del viburno è il periodo dal 12 al 19 ottobre, poiché durante questo periodo si verifica il massimo accumulo di acido ascorbico nei frutti del viburno.

3.2 Determinazione dell'attività antiossidante del limone, della rosa canina, della cannella e di vari tipi di tè

L'attività antiossidante dei materiali vegetali è stata determinata dal contenuto di vitamina C utilizzando il metodo della titolazione dello iodio, simile alla determinazione del contenuto di vitamina C nel viburno. Per lo studio sono stati presi i seguenti materiali vegetali: limone comune, viburno comune, rosa canina alla cannella e varietà di tè: mate verde, tè rosso Rooibos, tè bianco “Heavenly Wind”, tè verde “Azure Placer” e tè nero “Lisma”.

I risultati ottenuti sono presentati nelle Figure 3 e 4.

Dai risultati ottenuti si evince che il contenuto più elevato di vitamina C nel viburno comune è di 3,1 g/100 g a.s.v., nella rosa canina la vitamina è inferiore rispetto al suo contenuto nel viburno ed è di 1,2 g/100 g a.s.v. Il contenuto di acido ascorbico nel limone comune è di 0,04 g/100 g s.v., che è inferiore al contenuto vitaminico del viburno e della rosa canina.

Per analizzare l’attività antiossidante delle varietà di tè, il contenuto di vitamina C è stato determinato nel mate verde, nel tè rosso Rooibos, nel tè bianco Celestial Wind, nel tè verde Azure Placer e nel tè nero Lisma. I risultati dello studio sono mostrati nella Figura 4.

Dai risultati ottenuti è chiaro che il contenuto di vitamina C dipende dal tipo di tè. È stato stabilito che l'acido ascorbico si trova in maggiore quantità nel tè nero. L’erba mate e il tè rosso hanno il contenuto di vitamina C più basso rispetto ad altri tipi di tè.

3.3 Determinazione del contenuto di composti polifenolici in vari tipi di tè

Per lo studio sono stati utilizzati estratti di diversi tipi di tè: tè verde, tè rosso Rooibos, tè bianco “Heavenly Wind”, tè verde “Azure Placer” e tè nero “Lisma”.

La quantità di composti polifenolici è stata determinata in termini di tannino. I risultati dello studio sono mostrati nella Figura 5.

L'analisi dei risultati ha mostrato che il contenuto di composti polifenolici negli estratti di tè ha significati diversi e dipende dal tipo di tè. Il tè bianco ha il più alto contenuto di tannini. Il contenuto di tannino più basso tra i materiali studiati è stato trovato nei tè verdi e rossi.

3.4 Effetto dei componenti del tè sull'attività antiossidante

La quantità di vitamina C nel limone normale è stata determinata secondo il metodo.

All'estratto di tè di ciascuna varietà è stato aggiunto succo di limone ed è stato determinato il contenuto di vitamina C. La variazione dell'attività antiossidante è stata determinata dalla variazione del contenuto di vitamina C negli estratti di tè di ciascuna varietà prima e dopo il tempo di invecchiamento. I risultati ottenuti hanno mostrato che durante l'invecchiamento la concentrazione della vitamina diminuisce. Successivamente, è stata calcolata la riduzione percentuale del contenuto di vitamina C. I risultati ottenuti sono presentati nella Figura 6.

Dai risultati ottenuti risulta chiaro che il contenuto di vitamina C diminuisce dopo l'invecchiamento del 23-33%, a seconda del tipo di tè. La concentrazione di vitamina C nel tè nero è diminuita del 32,8%, nel tè bianco del 29%, nel tè verde del 26,5%, nel tè rosso del 24,7%, nel mate del 23%. Da ciò possiamo concludere che i componenti del tè riducono l'attività antiossidante.

conclusioni

Come risultato del lavoro svolto, sono state tratte le seguenti conclusioni:

1. È stato determinato che il contenuto di acido ascorbico nei frutti del Viburnum viburnum cambia durante il periodo di maturazione. Il momento ottimale per raccogliere il viburno è dal 12 ottobre al 19 ottobre. I frutti del Viburnum viburnum contengono la massima quantità di vitamina C durante questo periodo;

2. Il contenuto di acido ascorbico è stato determinato nei frutti di viburno, limone comune, cannella, rosa canina e in vari tipi di tè. È stato rivelato che il contenuto di vitamina C nel viburno comune è 3,1 g/100 g a.v., nella rosa canina cannella – 1,2 g/100 g a.v., nel limone comune – 0,04 g/100 g a.v. È stato stabilito che l'acido ascorbico si trova in maggiore quantità nel tè nero. L’erba mate e il tè rosso hanno il contenuto di vitamina C più basso rispetto ad altri tipi di tè.

3. È stato determinato il contenuto di polifenoli di vari tipi di tè. È stato stabilito che il tè bianco ha il più alto contenuto di tannini. Il contenuto di tannino più basso tra i materiali studiati è stato trovato nei tè verdi e rossi.

4. È stato stabilito che i componenti del tè influiscono sul contenuto di vitamina C. La diminuzione maggiore di vitamina C è stata osservata per il tè nero e ammontava al 32,8%. La diminuzione più piccola nella concentrazione di acido ascorbico è stata osservata per il tè mate ed è stata del 23%.

Parte metodologica. Lezione di biologia in terza media sull'argomento: "Le vitamine sono sostanze meravigliose"

Durante la preparazione della lezione, abbiamo utilizzato libri sui metodi di insegnamento della biologia, , , .

Obiettivi della lezione:

Educativo – per farsi un’idea sulle vitamine e sulle carenze vitaminiche, sugli standard nutrizionali sani;

Sviluppo: continuare a sviluppare la conoscenza degli studenti sulle sostanze biologicamente attive della cellula, garantendo la costanza della composizione dell'ambiente interno del corpo; sviluppo del pensiero logico; sviluppo della memoria.

Educativo: per mostrare la priorità della scienza domestica nella scoperta delle vitamine. Coltivare compostezza e concentrazione. Coltivare il pensiero indipendente. Educazione alle competenze igienico-sanitarie. Coltivare l’abitudine ad uno stile di vita sano.

Tipologia di lezione: combinata. Tipo di lezione: lezione - gioco di simulazione.

Sussidi didattici: presentazione “Vitamine”, scatola con verdure, gettoni (3 colori), carte con compiti, badge dei medici specialisti.

Metodi didattici: conversazione, lavoro autonomo, lavoro di gruppo.

Luogo della lezione: capitolo “Metabolismo ed energia”, argomento “Vitamine”. Età degli studenti: 8° grado.

Fase 1. Preparazione per la partita.

Brevi istruzioni per gli studenti. L'insegnante ricorda brevemente le regole del lavoro di squadra appese allo stand. (Le regole devono essere adottate dalla squadra all’inizio dell’anno scolastico.)

Tutti partecipano! Ascolta tutti!

Parla solo dell'argomento! Criticare le idee, non gli individui!

La classe è divisa in 2-3 gruppi - aziende, ogni azienda sceglie il proprio leader - il primario, e il primario nomina i restanti funzionari dell'azienda medica e propone il nome dell'azienda. (“Emergenza”, “Ippocrate”, “Camici bianchi”, ecc.).

Fase 2. Condurre un gioco - lezione - 40 minuti.

Fase 3. Generalizzazione – 5 minuti. Fine del gioco.

Analisi e sintesi del gioco (grading).

Durante le lezioni.

1. Fase introduttiva e organizzativa.

Ripetizione del materiale coperto.

L'essenza del gioco. Il consiglio distrettuale, preoccupato per il basso livello dell'assistenza medica, ha indetto un concorso per il miglior gruppo di medici (studio medico). L'azienda medica il cui personale è più professionalmente preparato e che affronterà i compiti meglio di altri riceverà lavoro nella regione. Agite come aziende concorrenti. Quale azienda vincerà il concorso?

Per vincere, un'azienda deve segnare 25 punti. Hai dei gettoni sui tavoli: gettoni rossi - 3 punti, gettoni verdi - 2 punti, gettoni gialli - 1 punto.

1 concorso

Il primario gestisce il lavoro della sua azienda, organizza la ricerca di informazioni e la registrazione delle risposte.

Il numero massimo di punti è 12.

Gioco “Cache of Miracles”. Per aprire qualsiasi cache, devi conoscere qualche segreto o codice. Ad esempio, Ali Baba è finito in una grotta con tesori, avendo sentito la password dai ladri - (cosa?) - "sim - sim". C'è anche qualcosa nella nostra cache (cassa con premi). Questi sono i premi. Non resta che aprirlo nominando la parola secondo il principio del gioco “Field of Miracles”. Per aprire ogni lettera vengono forniti tre tentativi: tre domande di varia difficoltà. La risposta corretta alla domanda inizia con la stessa lettera indovinata nella parola chiave. Ti faccio una domanda da 3 punti (gettone rosso), 30 secondi per pensarci, tu scrivi la risposta su un foglio di carta e il capitano della squadra la legge ad alta voce. La squadra che dà la risposta corretta riceve tre punti. Apro la lettera. Se non viene data la risposta corretta faccio una domanda che vale 2 punti (gettone blu) e se necessario 1 punto (gettone giallo). E se ancora non c'è risposta, apro la lettera, ma l'azienda resta senza punti.

Chiediamo alle aziende: se indovinate la parola prima di scriverla, non ditela ad alta voce. Quindi presta attenzione.

Compito: queste non sono proteine, grassi o carboidrati, ma un gruppo speciale di sostanze con una struttura chimica unica. Furono scoperti per la prima volta dallo scienziato russo Nikolai Ivanovich Lunin e 30 anni dopo dallo scienziato polacco Kazimir Funk. Ha dato loro il nome. La radice di questa parola significa “vita” in latino.

Bene, vediamo chi ottiene più punti e per chi si aprirà la cache. Faccio una domanda per indovinare la prima lettera di questa parola.

"IN". (3 punti). Una cultura indebolita di microbi introdotta nel corpo umano. (Vaccino).

"IN". (2 punti) Una sostanza complessa che costituisce circa 2/3 del peso corporeo umano. (Acqua).

Apri la lettera “B” sulla lavagna.

“Io” (3 punti). L’assenza o la carenza di questo ormone provoca la malattia “diabete mellito”. (Insulina).

“I” (2 punti) HIV – il virus distrugge il meccanismo di difesa. Quale? (Immunità).

“Io” (1 punto). Può essere batterico, virale, gocciolina, intestinale, polvere. L'ospedale ha un reparto speciale. (Infezione).

Apri la lettera “I” alla lavagna.

“T” (3 punti) Quale ghiandola svolge un ruolo centrale nel mantenimento dell'equilibrio ormonale nel corpo? (Talamo).

“T” Plasma sanguigno privo di fibrinogeno. (Trombo).

“T” Organo dell'apparato respiratorio, che è un tubo rivestito di mucosa. (Trachea).

Apri la lettera “T” sul tabellone segnapunti

“A” (3 punti) Un ormone prodotto dalla midollare del surrene. (Adrenalina).

“A” (2 punti) Queste sostanze vengono utilizzate nella lotta contro le infezioni intestinali. (Antibiotici).

“A” (1 punto). Il prodotto finale della degradazione delle proteine nel tratto digestivo. (Amminoacido).

Apri la lettera “A” sulla lavagna.

La parola “Vita” si è rivelata significare “vita”. A "Vita" Funk aggiunse anche "ammina" - un'ammina vitale e si rivelò essere la parola familiare "Vitamina". Contiamo quale azienda ha guadagnato più punti e quell'azienda pronuncia all'unisono la parola amata. Quindi la nostra "Cache of Miracles" è stata aperta. (Tiriamo fuori cavoli, carote, origano, olio di pesce, cipolle, ecc. Dal petto)

2. Fase di apprendimento di nuovo materiale.

Insegnante: Quindi, le vitamine non sono proteine, grassi o carboidrati, ma un gruppo speciale di sostanze con una struttura chimica unica. Furono scoperti per la prima volta dallo scienziato russo Nikolai Ivanovich Lunin e 30 anni dopo dallo scienziato polacco Kazimir Funk. Ha dato loro il nome. La radice di questa parola significa “vita” in latino. Le vitamine sono sostanze biologicamente attive che agiscono in quantità molto piccole. Contribuiscono al normale corso dei processi biochimici nel corpo, ad es. metabolismo. Le vitamine fanno parte di quasi tutti gli enzimi e, insieme a loro, sono acceleratori dei processi metabolici e influenzano la trasformazione dei nutrienti nelle cellule e nei tessuti. A differenza degli enzimi, le vitamine non possono essere sintetizzate dal corpo umano; entrano nel corpo con il cibo. Solo alcune vitamine sono prodotte dai batteri nel nostro intestino.

2 concorso.

1.Nome del gruppo di vitamine. (A - retinolo, C - acido ascorbico, ecc.);

2. In quali prodotti si trova? (Fornire alcuni esempi);

3. Effetti biologici e dose giornaliera, malattia per mancanza di cibo);

4. Breve storia della scoperta.

Gli studenti lavorano collettivamente con i libri di testo, quindi elaborano il risultato sotto forma di un diagramma libero.

3 concorso.

Maestro: I buoni medici, i medici competenti devono essere in grado di fare una diagnosi corretta. L'ulteriore trattamento e il recupero del paziente dipendono dalla diagnosi corretta. Offriamo reclami dei pazienti a ciascuna azienda. Devi fare la diagnosi corretta, cioè dare un nome alla malattia e giustificare la tua risposta. La risposta è lo specialista che dovrebbe curare un paziente del genere. Il primario rappresenta il medico che dirige la visita.

1 azienda. Denunce, contestazioni. Ho una strana malattia: di giorno, alla luce, vedo bene, ma quando entro nella stanza non vedo nulla. Come se sugli occhi fossero messi occhiali scuri. Esco nella luce e la mia vista si ristabilisce. Dottore, aiuto, per favore. (A – cecità notturna – oculista).

2 compagnia. Caro dottore. Mi fanno male le mani, o meglio la pelle delle mani, arrossamenti e screpolature della pelle provocano un dolore terribile quando mi muovo, sono sempre nervoso, posso piangere senza motivo o, al contrario, inizio a ridere, posso grido. E spesso ho anche disturbi intestinali, anche se mi attengo alla dieta. Cosa c'è che non va in me, dottore? (RR – pellagra – dermatologo).

3 compagnia. Caro dottore! Aiuto! Ero tormentato da continue emorragie dal naso e dolori alla schiena, o meglio alla colonna vertebrale. Le articolazioni fanno male, come dopo un carico pesante. (D – rachitismo – chirurgo).

Studenti: le aziende ricevono delle schede che descrivono la malattia, dopo la discussione devono fare una diagnosi e motivare la loro risposta. Una risposta corretta riceve 3 punti.

3. Formazione di conoscenze, competenze e abilità.

4 concorso.

Insegnante: Aziende ben fatte. La diagnosi era corretta. Ma deve anche essere trattato correttamente. Al giorno d'oggi, la medicina erboristica viene utilizzata in modo molto efficace. Di fronte a te ci sono fogli di carta con dati sul contenuto vitaminico di varie piante medicinali e un elenco di alcuni prodotti alimentari. Adesso è la primavera, il momento della carenza vitaminica, che tipo di dieta puoi offrire alla popolazione per un determinato periodo di tempo.

Agli studenti viene offerta una presentazione "Vitamine". In base a ciò che vedono, le aziende creano una dieta quotidiana e ricevono schede per compilare una dieta quotidiana: colazione, pranzo, merenda, cena. Per la risposta corretta ricevono 3 punti.

5 concorso.

Insegnante: Il compito più importante per tutte le aziende, i medici di ciascuna azienda devono superare un quiz. Le aziende rispondono alle domande del quiz.

1.Perché alle persone ipovedenti si consiglia di mangiare mirtilli e carote?

2. Ragazzi, che tipo di vitamina C è questa?

3. Frutti molto gustosi

E sono utili.

Molti grassi e vitamine.

Quanto sono nutrienti!

Noccioli mangiati nel cioccolato

Il guscio è una tintura brillante.

Indovina velocemente:

Che tipo di frutto stiamo cogliendo dai rami?

4.Che effetto medicinale hanno le noci?

5. Quali frutti venivano usati dai guaritori nei tempi antichi per lavare lo stomaco e l'intestino?

6. Queste foglie e frutti

Per il cuoco e il dottore

Sono insostituibili.

Fonte di vitamina C-

Sollievo dalla tosse.

Quei frutti colorati -

Trattamento con piacere.

7. Perché ai bambini viene prescritto olio di pesce insapore?

8. I bambini hanno maggiori probabilità di avere curvature della colonna vertebrale e delle gambe rispetto agli adulti. Tuttavia, i bambini hanno meno probabilità di rompersi le ossa rispetto agli adulti. Da quale sostanza dipende la presenza di nelle ossa? Da quali prodotti alimentari il corpo può ottenere questa sostanza? Quale vitamina è necessaria affinché il corpo assorba questa sostanza nelle ossa?

9. La primavera Petya “prende il sole” su una finestra chiusa. Fa caldo, ma non c'è l'abbronzatura. Ho aperto la finestra ed è diventata luce. E un'ora dopo c'era un'ustione sul corpo. Come possiamo spiegarlo? L'abbronzatura è salutare?

10. Nei mesi primaverili aumentano la stanchezza, la letargia e l'irritabilità. Le gengive sanguinano. Compaiono lividi sulla pelle. Perché succede questo? Come affrontare questo problema?

1.Le carote contengono vitamina A e i mirtilli contengono acidi organici che migliorano la vista.

2. Aiuta la crescita delle ossa, rafforza le pareti dei vasi sanguigni, aumenta la resistenza alle infezioni.)

4. La noce contiene 50 volte più vitamina C degli agrumi: limone, arancia. Contiene il 45-75% di olio, quindi è prescritto ai pazienti indeboliti per ripristinare le forze. Le foglie e la corteccia vengono bollite e usate per curare le ferite.

5. Frutti di zucca.

6. Ribes.

7. L'olio di pesce contiene vitamina D, necessaria per la corretta formazione dello scheletro.

8. Questa sostanza è il calcio, conferisce durezza alle ossa. I latticini contengono molto calcio. La vitamina D favorisce l'ingresso del calcio nelle ossa e previene il rachitismo.

9. Il vetro non lascia passare i raggi ultravioletti, quindi non è possibile abbronzarsi quando la finestra è chiusa. Ma anche aprendo la finestra, Petya si abbronza in modo errato, poiché la durata della sua prima esposizione al sole è di 5-10 minuti. Per evitare che la pelle si scotti, dovresti usare la protezione solare. L'esposizione al sole è necessaria poiché la vitamina D si forma nella pelle sotto l'influenza della luce solare.

10. Questa è una manifestazione di carenza vitaminica. In primavera, il corpo sperimenta una carenza di vitamine, che può essere corretta mangiando multivitaminici o introducendo nella dieta insalate di carote, mele, barbabietole, cavoli, cipolle, erbe aromatiche, ecc.

Successivamente verifica la correttezza delle risposte consultando la lavagna. Valutato sulla seguente scala: +8 – “5”; +7 –6 –“4”; +5–4 –“3”; meno: leggi il libro di testo.

Quindi trovare la media aritmetica dell'azienda, se la media aritmetica è uguale a: "5" - l'azienda riceve + 3 punti. "4" - l'azienda riceve +2 punti. "3" - l'azienda riceve + 1 punto. Il codice dei punti è scritto sul tabellone.

Insegnante: Cari medici dell'azienda! I seguenti proverbi sono offerti alla tua attenzione. Qual è l'essenza di questi proverbi? (Proverbi e stornelli sono scritti alla lavagna, analisi corretta di un proverbio - 1 punto).

Il pranzo senza verdure è una vacanza senza musica.

Vitya riuscì a contare -

Ho mangiato molte mele in estate.

Le mele contengono ferro

Tutti devono tenerne conto!

Il nostro Maxim è triste per qualche motivo,

Sembra molto pallido

Sbadiglia in classe -

Mancano le vitamine

E Nastenka è nei guai -

Non cresce affatto.

Il dottor Nastya ha dato consigli:

"Mangia carote a pranzo."

Bevi succhi, mangia frutta!

Questi sono prodotti deliziosi

Prendi le vitamine

E migliora la tua salute!

2. Frutta e verdura sono alimenti sani. 3. Preferire la frutta alle caramelle, alimenti molto importanti. 4. Mangia zuppa di cavolo: il tuo collo sarà bianco, la tua testa sarà riccia. 5. Mangia pesce e le tue gambe saranno veloci.

6. Le carote aggiungono sangue.

7. Cipolla - da sette disturbi. 8. Dove non c'è carne, le barbabietole sono un eroe.

(Le aziende analizzano i proverbi e durante l'analisi giungono alla conclusione sull'importanza delle vitamine per la salute umana.)

7 concorso.

Per i bambini, i loro padri e le loro madri

Vitamine, verdure.

Sia in giardino che nell'orto

Frutta e verdura crescono

Sono stati raccolti qui.

Ascolta attentamente,

Ricorda attentamente.

4. Riassumendo.

Insegnante: Care aziende, contate il numero di punti. Se la tua azienda ottiene 25-30 punti – “5”; 20–24 punti – “4”; 12-20 punti – “3”.

A tutti i membri della squadra viene assegnato lo stesso punteggio.

Ci congratuliamo con l'azienda che ha superato la barriera dei 25 punti e le regaliamo la licenza per aprire un'azienda medica.

5. Compiti a casa: studia il testo del libro di testo e compila la colonna 4 della tabella con i nomi dei prodotti alimentari nella tua dieta quotidiana.

Insegnante: Le grandi persone avevano atteggiamenti diversi nei confronti del cibo, ma erano unite in una cosa. Qualsiasi cibo dovrebbe essere sano. Vorrei concludere la lezione con le parole di Ippocrate: “Le nostre sostanze alimentari devono essere agenti medicinali, e i nostri agenti medicinali devono essere sostanze nutritive”.

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47. http://www.tea&coffee.ru/

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49. http://www.teainfo.ru/article_tmarket.html

50. www.antiossidante-of-food.bessmertie.ru

Allegato 1

Prodotto	Contenuto di vitamine, mg	Prodotto	Contenuto di vitamine, mg
Barbabietola	10	cavolo bianco	45
Carota	5	Rosa canina (secca)	1200
Pera	5	Ribes nero	200
Mela cotogna	23	Arance	60
Pesche	10	Limoni	40
Melograno	4	Mirtillo rosso	15
Ciliegia dolce di colore scuro	15	Mirtillo	15
Lamponi	25	Aronia	15
Fragole	60	Uva spina	30
Ciliegia	15	Acetosa	43
Prugna	10	Spinaci	55
Uva (nera)	6	Aneto	100
Mele invernali	16	Prezzemolo (verdure)	150
Patata	20	Sedano (verde)	38

Appendice 2.

Elaborazione matematica.

Calcolo del contenuto di tannini nei diversi tipi di tè.

Tavolo 2.

A = (∑ X medio)/5 = 4,274

С = (Ʃ x)²/ N = 0,024

Cy = Ʃx²C = 60,106

Сv= (Ʃ V)²/ (l - 1) = 42.681

Сz= Cy- Сv= 17.425

dispersione	somma	Grado di libertà	Piazza centrale	Ven	Pertanto
Ci	60,106	14	_________	_______	_______
CV	42,681	4	10,76	6,13	2,9
Сz	17,425	10	1,74	________	_________

Dal Fpr>

Сx = √(Sd²/N)= 0,66

Sd = √(2Sd²/N)=0,93

NSR = st95 Sd = 2,4

NSR0,5= ((st95 Sd)/ Xsr) 100% = 55,8%

Tabella 3.

Effetto dei polifenoli del tè sull'attività antiossidante.

A = (∑ X medio)/6 = 33,68 ≈ 34

Calcoliamo i valori del fattore correlato.

С = (Ʃ x)²/ N = -11,23

Cy = Ʃ x² C = 322,38

Сv= (Ʃ V²) / (l - 1) = 177,728

Сz= Cy- Сv= 144.652

dispersione	somma	Grado di libertà	Piazza centrale	Ven	Pertanto
Ci	322,38	17	_________	_______	_______
CV	177,728	5	35,5456	2,95	2,66
Сz	144,652	12	12,054	________	_________